小鼠血管生成素样蛋白3ELISA检测试剂盒
日本IBL 编号: 27410
简介
血管生成素样蛋白3(ANGPTL3)是由肝脏分泌的一种类激素蛋白,参与脂质新陈代谢和血管生成。血管生成素样蛋白3的结构与参与血管生成的血管生成素家族蛋白相似。它有螺旋域和纤维蛋白原样域,但没发现能与Tie家族结合。研究发现,ANGPTL3的基因表达受LXR因子调控,是一种备受关注的新颖分泌因子
实验原理
此试剂盒是一种夹心法的ELISA试剂盒,使用了两种高特异性的抗体。TMB作为显色剂,显色的强度与小鼠样品中ANGPTL3的量成正比
检测范围:
0.31 ~ 20 ng/mL
预期用途
此日本IBL小鼠血管生成素样蛋白3ELISA检测试剂盒能用于小鼠血清,EDTA血浆和细胞培养基中血管生成素样蛋白3的定量检测
试剂盒组成
1. 微孔板:
包被有抗小鼠ANGPTL3 兔IgG,亲合纯化 96孔x 1
2. 标记抗体:
(30倍浓缩),HRP标记抗小鼠ANGPTL3兔IgG,亲合纯化 0.4mlx 1
3. 标准品:重组小鼠血管生成素样蛋白3 0.5mL x 2
4. EIA缓冲液: 30mL x 1
5. 标记抗体稀释液:1%的BSA,含0.05%的吐温20的PBS 12mL x 1
6. 显色剂:TMB底物液 15mL x 1
7. 终止液:1N硫酸 12mL x 1
8. 洗涤缓冲浓缩液:(40倍浓缩),0.05%吐温20的磷酸缓冲液50mL x 1
操作指南
实验所需材料但试剂盒未提供
酶标仪(450nm) 移液器和枪头
量筒和烧杯 去离子水
冰箱(4℃) 坐标纸(对数/对数)
吸水纸 试管(用于标准品稀释)
孵箱(37±1℃)
洗瓶(用于洗板)
一次性试验试管
特别注意事项
1. 试验样品采集后应立即检测或是冻存,冻存的样品避免反复冻融,检测前应在低温下先将其完全溶解混匀
2. 试验样品用EIA缓冲液稀释
3. 试验样品和标准品建议做双份检测
4. 试验样品应在中性PH范围,有机溶剂的污染可能会影响检测结果
5. 只能用试剂盒提供的洗涤液洗板,否则会导致试验失败
6. 吸水纸上拍干微孔板,不能擦拭孔壁
7. TMB底物液应贮存于黑暗处,因其对光敏感,且避免接触金属
8. 加入终止液后,30min内必须于酶标仪读数
结果计算
绘制曲线前,所有的数据都应减去试验样品空白值,包括标准品和未知的样品。以标准品的OD值和浓度在对数-对数坐标纸上描点,绘制光滑标准曲线,从标准曲线上可直接读取未知样品的浓度