大鼠肿瘤坏死因子α ELISA检测试剂盒
日本IBL (编号:27194)
前言简介
肿瘤坏死因子α是分子量为17.5 kDa,由157个氨基酸组成的强效淋巴因子,在各种肿瘤细胞和靶细胞发挥着细胞毒素作用. 肿瘤坏死因子α在炎性前症发挥关键作用,并能在患有风湿性关节炎病人的骨滑液中检测到.它是免疫调节作用的初始调节者. 肿瘤坏死因子α的分泌是经过严格控制的,由极小量的休眠细胞分泌,主要为激活细胞的分泌因子.
原理
此试剂盒运用了两种特异性抗体,洗板后加入TMB底物液显色,显色的强度与大鼠肿瘤坏死因子α的量成正比.
检测范围
56.25 ～ 3,600 pg/mL
预期用途
■此IBL试剂盒能用于大鼠细胞培养上清中肿瘤坏死因子α的定量检测
■重组和天然的大鼠肿瘤坏死因子α都能检测
试剂盒成分
1 预包被板: 抗大鼠肿瘤坏死因子α兔子IgG,亲合纯化 96T
2 酶标记抗体:
(30倍浓缩)HRP标记抗大鼠肿瘤坏死因子α兔子IgG,亲合纯化 0.4mL x 1
3 标准品: 重组大鼠肿瘤坏死因子α 1.0mL x 2
4 EIA缓冲液: 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS30mL x 1
5 标记抗体稀释液: 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS12mL x 1
6 显色剂: TMB底物液15mL x 1
7 终止液: 1N硫酸12mL x 1
8 浓缩洗涤液:
(40倍浓缩) 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 50mL x 1
操作说明
1实验所需器材(但试剂盒没有提供)
酶标仪(450nm) 微移液管及其枪头
量筒及烧杯 去离子水
冰箱(4°C) 坐标纸(log/log)
吸水纸 试管(用于标准品稀释)
温育箱(37°C ± 1°C)
洗瓶 (用于洗板)
一次性试剂管(用于浓缩酶标记抗体和显色剂)
2准备
1) 洗涤液的准备
试剂盒的洗涤液是一种40倍浓缩液, 稀释前,将浓缩液平衡至室温.用1950 mL去离子水稀释50 mL的浓缩洗涤液,制成2000mL即用稀释洗涤液. 置于冰箱内可保存2周.
2) 酶标记抗体的准备
试剂盒中的标记抗体是一种30倍浓缩物,根据所需量,用标记抗体稀释液稀释30倍.
示例:
如果你用一条板(8孔),就需800 μL.的标记抗体.就用870 μL的标记抗体稀释液稀释30 μL抗体浓缩液,充分混匀.并每孔各加100 μL
浓缩酶标记抗体需稀释后才能用于实验
第3年
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