人多配体蛋白聚糖4（Syndecan-4）酶免试剂盒
（日本IBL 27188）
简介
多配体蛋白聚糖族共有4种(syndecan-1/多配体聚糖, syndecan-2/纤聚糖, syndecan-3/N-多配体聚糖, syndecan-4/抗凝蛋白聚糖)是一类跨膜的硫酸乙酰肝素糖蛋白（HSPGs）. HSPGs主要分布在特定的血管内皮细胞,并以多配体聚糖1,-2,-4和基底外侧表面定向靶的形式存在. syndecan家族成员是一类具有同源跨膜和细胞质外区的1型跨膜蛋白.这种结合跨膜的/细胞质域包含有4条完好的酪氨酸残基, 发挥着至关重要的生物学功能. 多配体蛋白聚-4的胞质尾区还能与粘着分子发生反应.众所周知,多配体蛋白聚糖4发挥着多种生物学功能(如抗凝作用, 细胞粘附, 细胞增殖)
实验原理
此试剂盒根据酶免法的夹心原理，利用两种不同的高特异性抗体，TMB作为着色剂，颜色强度与人Syndecan-4的量成正比
检测范围
20~1280pg/mL
预期用途
此试剂盒用于血清，EDTA-血浆和细胞上清中人Syndecan-4的定量检测
不建议采用肝素-血浆作为试验样品
试剂盒组成
1. 包被板，96孔，包被有抗人Syndecan-4兔IgG，亲和纯化
2. 标记抗体浓缩，30X，0.4mlx1，HRP标记的抗人Syndecan-4兔IgG Fab’，亲和纯化
3. 标准品，0.5mlx2，人Syndecan-4
4. EIA缓冲液，30mlx1,1%BSA，含0.05%吐温20的PBS
5. 标记抗体稀释液，12mlx1,1%BSA，含0.05%吐温20的PBS
6. 着色剂，15mlx1，TMB底物液
7. 终止液，12mlx1，1N硫酸
8. 洗涤缓冲浓缩液，50mlx1, 40X，含0.05%吐温20的磷酸缓冲液
实验所需材料但试剂盒未提供
1. 酶标仪（450nm）
2. 移液器和枪头
3. 烧杯
4. 蒸馏水
5. 冰箱（4℃）
6. 孵箱（37±1℃）
7. 坐标纸（对数-对数）
8. 吸水纸
9. 标准品稀释管
10. 洗瓶
11. 一次性试验管
试剂准备
1. 洗涤缓冲液制备：先将洗涤浓缩液平衡至室温，充分混匀，然后吸取50ml浓缩液与1950ml的去离子水混匀，即得。配制的洗涤液应保存于冰箱内，并于2周内用完
2. 标记抗体的制备：用标记抗体稀释液将标记抗体稀释30倍，即得。
例：如果只测一条板，8孔，则需要标记抗体800ul（30ul的标记抗体+870ul的标记抗体稀释液，混匀，使用时每孔加100ul）
此步骤在实验前完成
剩余的标记抗体浓缩应装于密封瓶内，保存在4℃
3. 标准品的制备：吸取0.5ml的去离子水至标准品瓶内，充分混匀，得到2560pg/ml的人Syndecan-4标准品
4. 标准品的稀释：准备8个试管用于标准品的稀释，每管加入230ul的EIA缓冲液
第3年
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