人内皮脂肪酶（EL）检测试剂盒
（日本IBL 27182 ）
简介
内皮脂肪酶是三酰甘油脂肪家族的一员，由血管内皮细胞合成；天然EL基因座破坏的工程鼠以及人EL过度表达的小鼠试验结果表明血浆中的HDL-C的水平与EL表达呈反比；同时先前有报道表明血浆中的EL量与人HDL-C浓度呈负相关；基于这些研究EL可能是HDL-C水平增加及防止动脉粥样硬化的病理靶标
此试剂盒用于血清或血浆样本中EL浓度
实验原理
此试剂盒是一种夹心法的elisa试剂盒，使用了两种高特异性的抗体。TMB作为显色剂，最终溶液所显示的颜色强度与样品中内皮脂肪酶的量成正比
检测范围
31.3 - 2,000 pg/mL
预期用途
仅用于研究，不能用于诊断
1. 此试剂盒可用于血清，EDTA血浆和细胞上清中忍内皮脂肪酶的定量检测
2. 血清和血浆样本的稀释比例大概为4倍
试剂盒组成
1. 包被板，96孔，包被了抗人EL小鼠IgG单抗亲和纯化
2. 标记抗体，浓缩，0.4ml x1，30倍浓缩，HRP标记的抗人EL（26A1A）小鼠IgG Fab’亲和纯化
3. 标准品，0.5ml x2 ,重组人内皮脂肪酶
4. EIA缓冲液，30ml x 1
5. 标记抗体稀释液，12ml x 1，含1% BSA, 0.05% 吐温20 的 PBS
6. 显色剂，15ml x 1，TMB
7. 终止液，12ml x 1,1N的硫酸
8. 洗涤缓冲液，50ml x 1，40倍浓缩，磷酸缓冲液
操作步骤
1. 实验所需材料但试剂盒未提供
1. 酶标仪（450nm）
2. 移液器和枪头
3. 带刻度的量筒和烧杯
4. 去离子水
5. 冰箱（4℃）
6. 坐标纸（对数/对数）
7. 吸水纸
8. 标准品稀释试管
9. 孵箱（37±1℃）
10. 洗瓶
11. 一次性试管
2. 准备
1. 洗涤缓冲液制备：先将洗涤浓缩液平衡至室温，充分混匀，然后吸取50ml浓缩液与1950ml的去离子水混匀，即得。配制的洗涤液应保存于冰箱内，并于2周内用完
2. 标记抗体的制备：用标记抗体稀释液将标记抗体稀释30倍，即得。
例：如果只测一条板，8孔，则需要标记抗体800ul（30ul的标记抗体+870ul的标记抗体稀释液，混匀，使用时每孔加100ul）
第3年
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