小鼠瘦素酶免试剂盒
(日本IBL 27160)
1950年发现隐性肥胖基因突变导致肥胖,且与二型糖尿病综合征的病态肥胖类似。1994年在洛克菲勒大学Freidman团队发现肥胖基因编码形成瘦素。瘦素是由肥胖基因产生的16KDa的分泌型蛋白。脂肪组织产生瘦素并释放至血液中,随着脂肪的累积,血液中瘦素的水平含量也呈增长趋势。瘦素作为lipostat,随着脂肪组织内脂肪的沉积而增加;它还可作为一激素,指令大脑终止食物的消化和增加活动;还证明了可用于标记和控制青春期的开始;另外,近期研究表明,瘦素可通过中枢神经系统抑制骨形成。
实验原理
此试剂盒是一种夹心法的ELISA试剂盒,使用了两种高特异性的抗体。TMB作为显色剂,最终溶液所显示的颜色强度与样品中瘦素的量成正比
检测范围
12.5~800pg/mL
此试剂盒用于小鼠血清,EDTA-血浆和细胞上清中瘦素的定量检测
试剂盒组成
1. 微孔板,96T,包被有抗小鼠瘦素兔子IgG抗体,亲和纯化
2. 标记抗体浓缩,30X,0.4ml,HRP标记的抗小鼠瘦素兔IgG Fab片段
3. 标准品,0.5ml,2支,重组小鼠瘦素
4. EIA缓冲液,30ml,1%的BSA,含0.05%的吐温20的PBS
5. 标记抗体稀释液,12ml,1%的BSA,含0.05%的吐温20的PBS
6. 着色剂,TMB,15ml
7. 终止液,1N硫酸,12ml
8. 洗涤缓冲浓缩液,40X,50ml,0.005%吐温20的磷酸缓冲液
准备步骤
试验所需材料但试剂盒未提供
l 酶标仪(450nm)
l 带刻度的量筒与烧杯
l 孵箱(37℃±1℃)
l 吸水纸
l 稀释试管
l 微量移液器和取样吸头
l 去离子水
l 坐标纸(log/log)
l 用于稀释标准品的试管
l 洗涤瓶