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超氧阴离子清除能力测试盒(微量法)
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详细内容
产品名称:超氧阴离子清除能力测试盒(微量法)
规格:100管/96样
储存条件:4℃
有效期:3个月
产品简介:
超氧阴离子自由基作为生物体代谢过程中产生的一种自由基,可攻击生物分子,如脂质、蛋白质、核酸和聚不饱和脂肪酸等,使其交链或者断裂,引起细胞结构和功能的破坏,与机体衰老和病变有很密切的关系,清除超氧阴离子自由基的研究已经得到了广泛的关注。
检测原理:
AP-TEMED 系统产生超氧阴离子,与盐酸羟胺反应生成 NO2-,NO2-与对氨基苯磺酸和 α-萘胺的作用生成红色的偶氮化合物,在 530nm 处有特征吸收峰,样品对超氧阴离子的清除能力与 530nm 的吸光值呈负相关。
试剂组成和配制提取液:
液体 100mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体 1.5mL×1 支,4℃避光保存。
试剂二:粉剂×1 瓶,4℃避光保存。临用前加 6mL 蒸馏水充分溶解。
试剂三:液体 7.5mL×1 瓶,4℃保存。
试剂四:液体 7.5mL×1 瓶,4℃避光保存。试剂五:液体 7.5mL×1 瓶,4℃避光保存。
样品处理:
1. 组织:按照质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g,加入 1mL提取液)加入提取液,冰浴匀浆后于 4℃,10000g 离心 10min,取上清置于冰上待测。
2. 细胞:按照细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500万细胞加入 1mL 提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔 7 秒,总时间 3min);然后 4℃,10000g 离心 10min,取上清置于冰上待测。3. 培养液或其它液体:直接检测。
4. 粉剂药物可配制成相同浓度,比如 1mg/mL。
注意事项:
1. 试剂一 4℃可保存 2 个月,配制好的试剂二 4℃可保存一周,建议实验前配制,并尽快使用。
2. 样品处理完后立即进行测定,或者低温保存不超过 24 小时。
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