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网状纤维染色液(改良Gordon-Sweets法)
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详细内容
产品名称:网状纤维染色液(改良Gordon-Sweets法)
规格:6×50ml
储存条件:2-8℃,避光
有效期:3个月
用途:网状纤维染色,适用于冰冻切片、石蜡切片、火棉胶切片,可区分胶原纤维
产品简介:
网状纤维(Reticular fiber)是网状结缔组织内的一种纤维,由网状细胞所产生,直径多在 0.2~1.0µm,有韧性而没有弹性,网状纤维的染色方法很多,但染色原理基本一致,都采用氨银浸法;改良 Gordon-Sweets 染色原理是利用氨银液易被组织吸附与组织的蛋白质结合,经甲醛还原成黑色或棕黑色的金属银,沉积于组织内及其表面;传统方法中还原后先采用氯化金调色,再用硫代硫酸钠溶液洗去组织上未还原的银盐,本改良法省略该步骤,使网状纤维对比得更清晰。
网状纤维染色液(改良 Gordon-Sweets 法)主要经过氧化、漂白、媒染、浸银、还原、复染等步骤,与改良 Gomori 法不同之处在于前者采用酸性氧化剂和核固红复染液。冰冻切片、低温切片和火棉胶切片均可用于网状纤维染色,各种固定液均可采用,重金属汞盐或锇盐固定液偶尔会产生一些非特异性银背景,常用于鉴别肿瘤的性质和来源、癌与肉瘤、淋巴肉瘤与网状细胞肉瘤、血管内皮瘤与血管外皮瘤、骨尤文瘤与骨网状细胞肉瘤、脑膜瘤与星形细胞瘤、恶性神经鞘瘤及早期浸润癌等。
自备材料:
1、10%福尔马林固定液、蒸馏水、二甲苯或环保脱蜡透明液、中性树胶
操作步骤(仅供参考):
1、组织固定于 10%福尔马林固定液,常规脱水包埋。
2、切片厚 4µm,常规或脱蜡透明液脱蜡至水。
3、把切片平置在染色架上,滴入配制好的 Gordon-Sweets 氧化剂,氧化5min,稍水洗。
4、草酸溶液漂白 1~2min,流水冲洗 2min,蒸馏水稍洗。
5、硫酸铁铵溶液媒染 5min,稍水洗,蒸馏水稍洗。
6、滴加 Gordon-Sweets 银氨溶液染色 3min,蒸馏水稍洗。
7、Gordon-Sweets 还原剂还原 1min,流水冲洗 10min。
8、核固红染色液染细胞核 5~10min,稍水洗。
9、常规脱水,二甲苯或脱蜡透明液透明,中性树胶封固。
染色结果:
网状纤维 | 黑色 |
胶原纤维 | 黄色至黄棕色 |
细胞核 | 红色 |
胞质 | 淡黄色 |
注意事项:
1、玻璃器皿必须用洗涤液浸泡 1 天,自来水冲洗干净,蒸馏水冲洗2 次。
2、10%福尔马林固定液是较为适合的固定液,不宜采用含汞的固定剂如Zenker 液,否则易导致切片非特异性沉淀。
3、Gordon-Sweets 氨银溶液不太稳定,对光的敏感性强,应 4℃避光保存,恢复至室温后使用。
4、本试剂盒除氨银溶液不稳定,保质期短,其他试剂保质期都较长,如氨银溶液过期,可单独选购此试剂,其他试剂可继续使用。
5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
6、本产品仅供科研实验用个,不做其他用途。
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