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支原体染色检测试剂盒
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详细内容
产品名称:支原体染色检测试剂盒
规格:100T
储存条件:-20℃,避光
有效期:12个月
用途:通过染色检测培养细胞中是否存在支原体污染。
产品简介:
培养细胞中的细菌污染、酵母污染或霉菌污染都在光学显微镜下可见,但支原体污染在光学显微镜下不可见,必须通过特定的检测方法进行检测。检测支原体污染的方法有很多种,包括支原体分离培养、支原体特异酶检测、RT-PCR 检测以及 DNA 荧光染色检测。上述检测方法中,除 DNA 荧光染色检测外操作步骤相对比较烦琐并且所需时间较长。
支原体染色检测试剂盒(Mycoplasma Stain Assay Kit)是经典的利用DNA荧光染色法在培养细胞中原位染色检测支原体或其它原核生物的试剂盒,主要用于检测培养细胞中是否存在支原体污染。其原理是利用荧光染料(bisbenzimide,Hoechst 33258)检测支原体污染。这种染料会结合到 DNA 的 A-T 富集区域,因为支原体的DNA中A-T含量高(55%~80%),所以可将其染色而被检测到。被支原体污染的细胞经染色后在细胞周围可看到许多小均一的蓝色荧光小点,即为支原体的 DNA 染色斑,说明有支原体污染。Hoechst 33258 的激发波长为 346nm,发射波长为 460nm;Hoechst 33258和双链 DNA 结合后,激发波长为 352nm,发射波长为 461nm。本试剂盒的荧光染色可快速、有效、地检测支原体污染。
注意事项:
1、荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽快检测,使用荧光封片剂时也应避光操作。
2、在为了获得细胞沉淀的离心的过程中,对于特殊细胞,如果细胞沉淀不充分,可以适当提高离心力或延长离心时间。3、Hoechst 染色液对人体有一定刺激性,请注意适当防护。
4、Hoechst 染色液避免反复冻融,否则容易失效。
5、固定液有刺激性气味,建议在通风橱进行固定。
6、检测支原体前-好用不含抗生素的培养液培养 2-3 代,这样更容易检测出支原体,因为一些抗生素可以抑制支原体生长。
7、本试剂盒用于 6 孔板检测时,可以进行 50 次检测反应。悬浮细胞及组织切片均可以进行 100~150 次检测反应。
8、检测支原体污染,可以使用支原体高效 Vero 细胞,这样可以提高检测灵敏度,即将被检测样品
9、接种于 Vero 细胞进行检测。
10、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
11、本产品仅供科研实验用,不做其他用途。
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