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台盼蓝染色液(1%)
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详细内容
产品名称:台盼蓝染色液(1%)
规格:10ml
储存条件:2-8℃
有效期:12个月
用途:又称锥虫蓝染色液,用于细胞染色,细胞计数
产品简介:
台盼蓝(Trypan blue)又称锥蓝或锥虫蓝等,分子式为 C34H24N6Na4O14S4,分子量为960.81,CAS Number 72-57-1,是一种阴离子型染料。Trypan Blue 不能透过活细胞正常细胞膜,故活细胞不着色,即产生所谓的拒染现象,而死亡细胞的细胞膜通透性增加,可使染料通过细胞膜进入细胞内,使死细胞着色呈蓝色,是常用的检测细胞活率的方法。通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡,这与中性红作用相反,因此借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞,台盼蓝是组织和细胞培养中常用的死细胞鉴定染色方法之一。
Trypan Blue Stain(1%)常用于检测细胞膜的完整性以及细胞是否存活,活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色,台盼蓝可被巨噬细胞吞噬,故可用于巨噬细胞的活体染色剂,台盼蓝染色后通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数,就可以对细胞存活率进行比较精确的定量,0.4%为常用的浓度。
自备材料:
1、 PBS2、 细胞计数板、显微镜
操作步骤(仅供参考):
1、收集细胞:如果收集贴壁细胞,应用胰蛋白酶-EDTA 溶液消化细胞,收集细胞;如果收集悬浮细胞,则可以直接收集细胞。收集好的细胞在 1000~2000g 离心1min,弃上清,用 1ml PBS 重新悬浮细胞沉淀。
2、台盼蓝染色:吸取 100µl 细胞悬液到 1.5ml 或 0.5ml 离心管内,加入100µl TrypanBlueStain(1%)轻轻混匀,静置染色 3min(染色时间可适当延长,但不宜超过10min)。
3、细胞计数:吸取经过染色后的细胞,用血细胞计数板计数。通常如果要比较精确地进行定量,每个细胞样品至少需要数 500 个细胞,数出蓝色细胞和细胞总数。
细胞存活率计算公式如下:
细胞存活率=(细胞总数-蓝色细胞数)/细胞总数×100%
注意事项:
1、Trypan Blue Stain(1%)对人体有轻微毒性,请注意小心防护。
2、注意凋亡小体偶尔也有台盼蓝拒染现象。
3、试剂开封后请尽快使用,以防影响后续实验效果。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
5、本产品仅供科研实验用,不做其他用途。
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