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碘化丙啶PI染色液(50ug/ml)
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详细内容
产品名称:碘化丙啶PI染色液(50ug/ml)
规格:10ml
储存条件:-20℃,避光
有效期:6个月
用途:流式细胞术检测细胞DNA含量,通过染色定量分析DNA,亦可通过荧光显微镜观察形态变化。
产品简介:
碘化丙啶染色(PI Stain)可以对细胞周期与细胞凋亡进行分析,碘化丙啶(PropidiumIodide,PI)是一种可以嵌合到双链 DNA 和 RNA 的碱基对中并与之结合的荧光染料,无碱基特异性。碘化丙啶与双链 DNA 结合后可以产生荧光,并且荧光强度和双链DNA的含量成正比,细胞内的 DNA 被 Propidium Iodide 染色后可以用流式细胞仪对细胞进行DNA含量测定,然后根据 DNA 含量的分布情况,可以进行细胞周期和细胞凋亡的分析。碘化丙啶染色后假设 G0/G1 期细胞的荧光强度为 1,那么含有双份基因组 DNA 的G2/M期细胞的荧光强度的理论值为 2,正在进行 DNA 复制的 S 期细胞的荧光强度为1~2 之间。凋亡细胞由于细胞核发生浓缩以及发生 DNA 片段化(DNA fragmentation)导致部分基因组DNA-片断在染色过程中丢失,因此凋亡细胞碘化丙啶染色后呈现明显的弱染,即荧光强度小于1,在流式检测的荧光图上出现所谓的 sub-G1 峰,即凋亡细胞峰。细胞凋亡时流式细胞检测可呈现亚二倍体核型的特征,根据光散射的特点,PI 染色可以区分细胞凋亡和细胞坏死的细胞峰型。细胞凋亡时出现凋亡细胞皱缩、染色质浓缩、核碎裂,产生凋亡小体,使细胞的前向光散射低于正常;在细胞凋亡的早期细胞对前向角光散射的能力显著降低,对侧向光散射的能力增加或没有变化;在细胞凋亡的晚期前向和侧向光散射的信号均降低;细胞坏死时细胞多表现为细胞肿胀,因此前向光散射高于正常,对侧向光散射高于正常。 碘化丙啶 PI 染色液(50µg/ml)主要由 PI、破膜剂等组成,经常用于培养的贴壁或悬浮细胞的细胞周期与细胞凋亡检测, 亦可用于区分细胞凋亡和细胞坏死,其工作浓度多为 20~50µg/ml,不含 RNase,推荐用于 RNA 染色,细胞检测含量范围一般为0.1~1×106之间。
注意事项:
1、荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽快检测。
2、为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
3、在为了获得细胞沉淀的离心的过程中,对于特殊细胞,如果细胞沉淀不充分,可以适当提高离心力或延长离心时间。4、如果用于组织的细胞周期与细胞凋亡检测,则必须把组织消化后,制备成单细胞悬液,才可以进行检测。
5、细胞凋亡时,凋亡细胞的标志之一是 DNA 可染行降低,但这种情况并是的,DNA含量的降低或者 DNA 与染料结合能力下降也会导致 DNA 可染行降低,在分析的时候应特别注意。
6、PI 对人体有一定刺激性,请注意适当防护。
7、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
8、本产品仅供科研实验用,不做其他用途。
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