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DAPI染色液(5ug/ml)
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详细内容
产品名称:DAPI染色液(5ug/ml)
规格:10ml
储存条件:-20℃,避光
有效期:6个月
用途:DAPI染色常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。
产品简介:
DAPI 染色液(DAPI Staining Solution)是适用于常见细胞和组织细胞核染色的染色液,DAPI 即 2-(4-Amidinophenyl)-6-in dolecarbamidine dihydrochloride ,也称DAPIdihydrochloride,分子式为 C16H15N5·2HCl,分子量为 350.25,是可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,和双链 DNA 结合后可以产生比 DAPI 自身强 20 多倍的荧光,灵敏度高于EB。DAPI 染色常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测,DAPI 也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链 DNA 染色,DAPI 的激发波长为340nm,发射波长为 488nm,DAPI 和双链 DNA 结合后,激发波长为364nm,发射波长为 454nm。
DAPI 染色液(5µg/ml)可以直接用于固定细胞或组织的细胞核染色,亦可以根据实验具体要求,稀释到相应浓度后进行染色,一般推荐工作浓度为0.5~10µg/ml。
自备材料:
1、 荧光显微镜、微量移液器
2、 蒸馏水、PBS 或生理盐水
操作步骤(仅供参考):
1、对于细胞或组织样品,固定后冲洗去除固定剂,如果需要进行免疫荧光染色,则先-进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行 DAPI 染色,如果不需要进行其它染色,则直接进行后续的 DAPI 染色;对于贴壁细胞或组织切片,加入少量 DAPI 染色液(5µg/ml),覆盖住样品即可;对于悬浮细胞,至少加入待染色样品 3 倍体积以上的 DAPI 染色液(5µg/ml),充分混匀。
2、室温放置 5~8min。轻轻吸除 DAPI 染色液(5µg/ml)。
3、用无菌的 PBS 或生理盐水清洗 2~3 次,每次 3~5min。
4、直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。
染色结果:细胞发生凋亡时,会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。
注意事项:
1、 DAPI 染色液(5µg/ml)的浓度适用于绝多数常规染色的需要。
2、荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽快检测。
3、为减缓荧光淬灭,可以使用抗荧光淬灭封片液。
4、避免反复冻融,否则容易失效。
5、DAPI 对人体有一定刺激性,请注意适当防护。
6、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
7、本产品仅供科研实验用,不做其他用途。
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