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TY培养基
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品牌名称：信帆生物型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/21 8:07:47
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详细内容
产品名称：TY培养基
规格：500ml
储存条件：2-8℃
有效期：6个月
用途：用于发根农杆菌的增菌培养，含有酵母粉、蛋白胨、氯化钙等成分。
产品简介：
发根农杆菌是根瘤菌科(Rhizobiaceae)农杆菌属(agrobacterium)的一种革兰氏阴性土壤细菌，它能够感染多数双子叶植物和少数单子叶植物以及个别裸子植物。K599发根农杆菌含有 pRi2659 农杆碱型 Ri 质粒，具有广泛的宿主范围(葫芦科、豆科等)，同时具有链霉素抗性。发根农杆菌可以使用常规的 TY 培养基进行培养。
TY 培养基又称 TY 液体培养基，主要由胰蛋白胨(Tryptone)和酵母提取物(Yeast extract)、氯化钙等组成，不含琼脂粉，一般 pH 值约为 7.0，经 15psi 高压灭菌20min。
操作步骤(仅供参考)：
1、发根农杆菌甘油菌培养：
①取出甘油菌置于冰上，并置于超净台内，后续操作都在超净台内操作。
②把镊子的顶端在 70%酒精中蘸一下，并且在酒精灯上略略烧一下，使镊子的顶端处于无菌状态。
③用镊子夹取一个无菌的塑料枪头或牙签，蘸取甘油菌，然后把蘸有菌液的塑料枪头或牙签放到含有 50µg/ml 链霉素 的 TY 液体培养基的试管内或细菌培养瓶内，28~30ºC，约 200rpm 培养至少 24h。
2、农杆菌感受态细胞的培养：
①取⁻⁷0°C 保存的农杆菌感受态于室温或冰水浴片刻待其部分融化，处于冰水混合状态时插入冰浴中。
②每 100µl 感受态加 1µg 质粒 DNA，用手拨打管底混匀，依次于冰上静置5 分钟、液氮 5 分钟、37°C 水浴 5 分钟、冰浴 5 分钟。
③加入 800µl TY 液体培养基，于 28°C 振荡培养 2~3 小时。④5000rpm 离心 1min 收菌，留取 100µl 左右上清，轻轻吹打重悬菌块，涂布于含相应抗生素的 TY 平板上，倒置放于 28°C 培养箱培养 2~3 天。
注意事项：
1、注意无菌操作，尽量避免污染。
2、刚刚化冻的细胞，转化效率高。
3、感受态细胞应保存在⁻⁷0℃，应避免反复冻融，以免降低感受态细胞的转化效率。
4、混匀质粒时应用手指快速拨打管底或用枪吹吸混匀，务必使质粒快速、均匀分散开，与感受态细胞充分接触。转化高浓度的质粒可相应减少终用于涂板的菌量。平板上阳性克隆密度过时，由于营养不足，阳性克隆生长变慢，菌落变小，为了获得的菌落，应减少质粒用量或降低涂板的菌量。
5、K599 具有链霉秦抗性，不可用于具有链霉素抗性质粒的转化。
6、试剂开封后请尽快使用，以防影响后续实验效果。
7、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
8、本产品仅供科研实验用，不做其他用途。
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