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PEG8000溶液(50％,无菌)
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/21 8:07:47
产品名称：PEG8000溶液(50％,无菌)
规格：10ml
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详细内容
产品名称：PEG8000溶液(50%,无菌)
规格：10ml
储存条件：2-8℃
有效期：6个月
用途：聚乙二醇诱导细胞融合，可用作融合剂,以获得生产单克隆抗体的杂交瘤细胞,诱导细胞杂交
产品简介：
聚乙二醇(Polyethylene glycol ,PEG)有众多品种，常见的有PEG400、PEG1500、PEG4000、PEG6000、PEG8000 等，聚乙二醇系列产品无毒、无刺激性，味微苦，具有良好的水溶性，并与许多有机物组份有良好的相溶性，具有润滑性、保湿性、分散性、粘接剂、抗静电剂及柔软剂等，在化妆品、制药、化纤、橡胶、塑料、造纸、油漆、电镀、农药、金属加工及食品加工等行业中均有着为广泛的应用。依相对分子质量不同而性质不同，从无色无臭黏稠液体至蜡状固体，分子量 200～600 者常温下是液体，分子量在600以上者就逐渐变为半固体状，随着平均分子量的不同，性质也有差异，从无色无臭粘稠液体至蜡状固体，随着分子量的增，其吸湿能力相应降低；其中 PEG4000 和PEG6000常用于促进 PEG8000 溶液(50%,无菌)主要由 PEG8000(CAS 号 25322-68-3)、磷酸盐等组成，其作用原理是能够改变各类细胞的膜结构，使两细胞接触点处质膜的脂类分子发生疏散和重组，两细胞接口处在双分子层质膜的相互亲和以及彼此的表面张力作用下，细胞发生融合；PEG8000 溶液(50%,无菌)可用作融合剂，以获得生产单克隆抗体的杂交瘤细胞，诱导细胞杂交，该试剂经严格无菌处理。
自备材料：
1、CO2 培养箱、离心机
2、MEM 培养基、胎牛血清、HAT、HT、A Media Supplement、胰蛋白酶消化液
操作步骤(仅供参考)：
1、如果变成胶冻状，可 37~60℃水浴使其变成溶液。
2、单层贴壁细胞：将杂交前体细胞以相同数量(5×104/ml)接种，以适当的培养基培养细胞，待细胞贴壁扩展至汇合成片（80%汇合率）的密度，吸干培养液，加入2ml PEG8000溶液(50%,无菌)，轻轻转动 1min 使 PEG8000 溶液覆盖细胞，静置1min，加入5ml MEM 培养液以稀释 PEG8000 溶液，吸干净稀释的 PEG8000 溶液，再用5mlMEM 培养液洗涤被 PEG 处理的细胞，吸干净洗液，加入 5ml MEM培养液，37℃，5%CO2 培养过夜，24~48h 后先吸去培养液，加入胰酶消化液处理细胞，待细胞消化后吸除胰酶消化液，用 HAT 选择培养剔除 HPRT 和 TK 缺陷细胞，弃上清液，用补加1×HT 和 1×A 的培养液重新悬浮细胞，融合 12~24h 后进行异核体分析，杂交前体细胞在 4~5 天内发生死亡，对于多数融合前体细胞而言，10~14 天可见杂交细胞克隆。
3、悬浮细胞：将两种不同亲体的细胞各 1ml(约为 1×107)混匀，800g 离心10min 以沉淀杂交前体细胞，弃上清液，使之剩余约 1ml，手指轻弹管底或手摇离心管使两种细胞混匀并重新悬浮，在离心管中加入 1ml PEG8000 溶液(50%,无菌)，置于37℃水浴2min，加入 5ml 提前 37℃预热的含 10%胎牛血清的 MEM 培养液，使PEG8000 稀释并停止作用，1000g 离心 5min，弃上清液，加入 5ml MEM 培养液以稀释PEG8000溶液，吸干净稀释的 PEG8000 溶液，用 5ml 无血清 MEM 培养液，手摇离心管重悬细胞(不要破坏细胞)，1000g 离心 5min，弃上清液，重复 1 次该步骤；加入含有20%的胎牛血清的 HAT 选择培养液，混匀，将细胞悬液用培养液稀释至 5×104/ml,接种于96孔板(每孔 0.1ml)或其他器皿中，37℃ 5%CO2孵育过夜 24~48h 后选出融合细胞。
注意事项：
1、应注意无菌操作，避免被微生物污染。
2、PEG8000 溶液较为粘稠时，可 37~60℃水浴使其变成溶液。
3、体外培养的单层贴壁细胞或悬浮细胞均可做融合，但成功概率较的是单层贴壁细胞。
4、试剂开封后请尽快使用，以防影响后续实验效果。
5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
6、本产品仅供科研实验用，不做其他用途。
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