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EDTA细胞消化液(0.04%)
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详细内容
产品名称:EDTA细胞消化液(0.04%)
规格:100ml
储存条件:室温
有效期:12个月
用途:细胞消化液的一种,含有pbs和edta,不含胰蛋白酶,对细胞损伤较小。
产品简介:
EDTA 细胞消化液(0.04%)由 PBS、EDTA(乙二胺四乙酸)配制而成,经无菌处理,不含胰蛋白酶,在细胞消化中的作用原理主要基于其螯合作用,通过选择性结合细胞间和细胞- 基质连接处的二价阳离子(如 Ca²+、Mg²+),破坏细胞黏附系统的稳定性,对细胞损伤较小,能有效地使贴壁细胞与培养瓶或培养皿表面脱离而达到分离细胞目的。其特点是:1、作用温和;2、对细胞的损伤和破坏小,不影响细胞生物学特性,是肿瘤细胞的好细胞脱壁方法;3、可以在血清存在的情况下进行消化。消化后的细胞可进行传代培养,亦可用于提取核蛋白和胞浆蛋白、Western Blot、免疫共沉淀等实验,通常室温下 3~10min 即可消化下多数贴壁细胞。
自备材料:
1、 PBS、培养液、倒置显微镜、离心机
操作步骤(仅供参考):
贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、培养液洗涤细胞 1 次。
②加入少量 EDTA 细胞消化液(0.04%),略盖过细胞即可(一般按细胞的有效体积的10倍添加)。
③室温放置 2~10min,如置于 37℃脱壁反应会加速,直到细胞脱壁,不同的细胞消化时间有所不同;亦可显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除消化液。
④加入细胞培养液或 5 倍体积 PBS 缓冲液终止反应。如果发现消化不足,则加入本品重新消化。
⑤1000~2000g 离心 3~5min,沉淀细胞,弃上清,尽量去除细胞消化液,加入含血清的培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
注意事项:
1、尽量减少反复冻融的次数,以免失效。
2、试剂开封后请尽快使用,以防影响后续实验效果。
3、在使用细胞消化液的过程中,要特别注意避免消化液被细菌污染。
4、细胞消化液消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。
5、37℃时作用速度比 4℃快 6-8 倍,但细胞死亡率增加。
6、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
7、本产品仅供科研实验用,不做其他用途。
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