当前位置: 阿仪网 > 上海信帆生物科技有限公司 > 产品展示 > 实验室代测实验项目 > TRAP染色实验服务
TRAP染色实验服务
企业档案
会员类型:旗舰版
已获得阿仪网信誉 等级评定
(0 -40)基础信誉积累,可浏览访问
(41-90)良好信誉积累,可接洽商谈
(91+ )优质信誉积累,可持续信赖
阿仪网旗舰版会员:14年
最后认证时间:
注册号:**** 【已认证】
法人代表: 【已认证】
参观次数:8444106
手机网站:http://wap.app17.com/c85413/
旗舰版网址:http://www.shxfbio.com
详细内容
检测原理:
TRAP是破骨细胞的特异性标志酶,能够在酸性环境中水解磷酸酯。在含有酒石酸的酸性条件下,TRAP能够水解萘酚AS-BI磷酸酯,生成的萘酚AS-BI与显色剂(如偶氮副品红、fast red或六唑-副玫瑰苯胺等)结合,形成不溶于水的红色沉淀。这一反应仅在破骨细胞中发生,因此可以通过显微镜观察到特定细胞的红色颗粒,从而实现定位。
实验步骤:
1、样本准备:准备骨组织的石蜡切片、冰冻切片或培养的破骨细胞。样本的制备质量直接影响染色效果,因此应严格按照操作程序进行。
2、固定与清洗:使用适当的固定液(如4%的多聚甲醛)固定样本,然后用PBS缓冲液清洗,以去除残留的固定液和杂质。
3、染色液配制:按照一定比例和顺序配制TRAP染色工作液。注意,染色液应现配现用,避免长时间储存导致成分分解影响染色效果。
4、染色:将配制好的染色液倒入染色缸中,水浴加热至适当温度(通常为37℃)。将样本放入染色缸中,避光孵育一定时间(如45-60分钟)。孵育时间应根据实验目的和样本类型进行调整。
5、复染:使用苏木素染色液或甲基绿染色液对样本进行复染,以增强细胞核的对比度。复染时间也应根据实验需求进行调整。
6、后处理:染色后的样本需要用去离子水清洗,以去除未反应的染色液。然后依次经过脱水、透明和封片等步骤处理。
注意事项:
1、实验条件控制:TRAP染色通常在37℃下进行,以酶活性的佳状态。过高或过低的温度都可能导致酶活性下降,影响染色效果。
2、染色时间把握:染色时间是影响TRAP染色结果准确性的重要因素。过短的染色时间可能导致染色不充分,而过长的染色时间则可能导致背景染色增加,影响结果的判读。
3、染色液避光保存:TRAP染色液中的某些成分对光敏感,容易在光照下分解。
仅供科研实验用,不做其他用途!
热门标签:TRAP染色实验服务












