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Mallory三色染色
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详细内容
染色原理:
Mallory三色染色法利用多种染料对组织切片进行染色。其中,胶原纤维和网状纤维主要被苯胺蓝染成蓝色,软骨、黏液等被染成淡蓝色,神经胶质纤维、肌纤维等被酸性复红染成红色,而橘黄G则用于使细胞质等呈黄色。通过这些染料的组合使用,可以清晰地显示出组织中的不同成分。
实验步骤:
1、组织切片:选取待染色的组织样本,进行切片处理。
2、脱蜡:将切片放入二甲苯中脱蜡,依次经过两次二甲苯,每次5~10分钟。
3、水化:将切片依次放入梯度酒精(100%、95%、80%、70%等)中进行水化,每级酒精中浸泡2~3分钟,然后用蒸馏水冲洗。
4、染色:将切片放入Mallory染液(由苯胺蓝、橘黄G、酸性复红等组成)中染色5~10分钟。
5、分化:用0.5%醋酸溶液分化,去掉多余的染色,镜下控制分化程度,直到组织结构清晰。
6、脱水:依次放入梯度酒精脱水。
7、透明:将切片放入二甲苯中透明。
8、封片:用中性树胶封片。
注意事项:
1、组织切片脱蜡应,脱蜡不净是影响染色的重要原因之一。
2、应根据染片的多少及染液的新鲜程度掌握染色时间的长短。
3、酸性复红液易溶解于水,在染色过程中要注意观察切片上保留的红色程度。
4、苯胺蓝液染色后,用95%乙醇分化时,须用镜下观察掌握分化程度。
5、对陈旧的固定标本,其染色效果较差,可增加染色时间。
仅供科研实验用,不做其他用途!
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