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技术文章
信帆生物：小鼠抗缪勒管激素实验技术服务
点击次数：166 发布时间：2026/9/22 13:55:16
信帆生物：小鼠抗缪勒管激素实验技术服务
信帆生物主营产品: 质控样品，干扰物质，抗体抗原，elisa试剂盒，动物血制品，生化试剂盒等。实验代做服务：HE染色/特殊染色/技术服务、免疫组化实验服务、Western blotting实验服务、RT-PCR实验技术服务,QPCR(荧光定量PCR）、酶联免疫ELISA、生化测试、液相气相检测等。
抗缪勒管激素（AMH），是转化生长因子 β 超家族的糖蛋白激素。雄性胚胎阶段由睾丸支持细胞分泌，诱导缪勒管退化，主导雄性生殖管道分化；雌性个体主要由卵巢内窦前、小窦卵泡的颗粒细胞合成，能够抑制原始卵泡的过度募集，维持卵巢卵泡储备池稳定。AMH 血清水平不受月经周期明显影响，是评估卵巢储备功能稳定指标。动物实验常以 ELISA 检测样本 AMH 含量，多用于卵巢衰老、性腺损伤模型构建以及卵泡发育调控机制的相关探究。
检验原理（仅供参考）：
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被小鼠抗缪勒管激素（AMH）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠抗缪勒管激素（AMH）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
产品性能指标：
1.检测范围：125 pg/mL - 4000 pg/mL。
2.灵敏度：最低检测浓度小于10 pg/mL。
3.特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4.重复性：板内变异系数小于10%，板间变异系数小于15%。
操作步骤：
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3. 待测样本孔先加待测样本50μL，空白孔不加；
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
样品收集、处理及保存方法：
以下只是列出样品采集的一般指南。所有样本采集过程中，不得使用叠氮钠做为防腐剂。
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
4. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最-后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
注：标本溶血会影响最-后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
原创作者：上海信帆生物科技有限公司
