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技术文章
信帆生物提供：小鼠TGF-β3 WB实验技术服务
点击次数：205 发布时间：2026/9/17 16:26:06
信帆生物提供：小鼠TGF-β3 WB实验技术服务
信帆生物主营产品: 质控样品，干扰物质，抗体抗原，elisa试剂盒，动物血制品，生化试剂盒等。实验代做服务：HE染色/特殊染色/技术服务、免疫组化实验服务、Western blotting实验服务、RT-PCR实验技术服务,QPCR(荧光定量PCR）、酶联免疫ELISA、生化测试、液相气相检测等。
转化生长因子-β3（TGF-β3）属于 TGF-β 超家族的分泌型细胞因子，小鼠对应基因为 Tgfb3，广泛表达于内皮、成纤维细胞、上皮及软骨细胞。其以潜伏复合物形式合成，经剪切激活后结合受体启动 Smad 信号，调控细胞增殖、迁移与细胞外基质代谢。该因子参与胚胎腭部发育，与 TGF β1 相比促瘢痕纤维化效应更弱，介导无瘢痕组织修复，同时参与血管重构、瓣膜发育及纤维化进程。WB 检测可见约 50 kDa 前体蛋白与 25 kDa 活性二聚体条带，常用于组织损伤与血管纤维化相关机制研究。
实验流程：
1、样本制备：小鼠组织液氮速冻，RIPA 裂解液添加蛋白酶抑制剂，冰上裂解，离心取上清；BCA 测定蛋白浓度。
2、电泳：12% SDS-PAGE 分离胶，浓缩胶 80 V，分离胶 120 V 电泳。
3、湿转：100 V 恒压，45–60 min，转至 PVDF 膜。
4、孵育封闭：5% 脱脂牛奶室温封闭 1 h；TGF-β3 一抗 4℃摇床过夜；TBST 洗涤后，HRP 二抗室温孵育 1 h。
5、ECL 发光成像，采集条带，灰度定量，内参校正。
注意事项：
1、TGF-β3 为分泌蛋白，注意样本低温保存，避免反复冻融造成降解，无需磷酸酶抑制剂。
2、蛋白存在前体（~50 kDa）与活性二聚体（25 kDa），两条条带均可检出，需明确抗体识别区段。
3、小分子蛋白转膜时间不宜过长，防止转过；膜全程保持湿润，避免干膜导致背景升高。
样本运输要求：
1、样本预处理：小鼠组织离体后迅速液氮速冻，标记分组，置于- 80℃长期保存，严禁反复冻融。
2、包装方式：冻存管拧紧封口，使用冻存盒固定，防止运输中管体破损。
3、运输条件：干冰低温运输，足量干冰包裹样本；泡沫保温箱封装，外箱标注低温生物样本。
4、样本信息：随箱附带送检清单，注明样本编号、分组、组织类型、检测指标。
5、注意事项：避免常温暴露；干冰运输预留缓冲空间，防止冻存管挤压破裂；分泌蛋白易降解，尽量缩短运输时长。
原创作者：上海信帆生物科技有限公司
