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技术文章
信帆生物供应谷草转氨酶（AST)科研检测服务
点击次数：225 发布时间：2026/9/7 15:20:58
谷草转氨酶（AST)科研检测服务
谷草转氨酶，又称天门冬氨酸氨基转移酶，是临床与科研常用的损伤标志物。AST广泛分布于组织中，在肝细胞内同时存在于胞浆与线粒体，心肌、骨骼肌、肾脏、红细胞中含量丰富。
科研中常与谷丙转氨酶（ALT）配套检测，用于评估肝细胞损伤。ALT主要位于肝细胞胞浆，轻度损伤即可释放；AST大量储存在线粒体，细胞损伤较重时才会大量释放。
检测原理：
采用生化比色法/连续监测法。在适宜反应体系中，AST催化天门冬氨酸与α-酮戊二酸发生转氨基反应，生成草酰乙酸与谷氨酸；草酰乙酸进一步反应生成有色产物，通过分光光度计监测吸光度变化速率，计算得到样本中AST酶活性。
1、样本接收：血清、血浆
2、实验步骤：
(1)工作试剂的配制：单试剂法将R1，R2按说明书比例配制混匀;双试剂法将R1，R2分别应用。
(2)在全自动生化仪上设置好相应参数。
(3)上样。全自动生化仪自动测定。
样品收集、处理及保存方法：
以下只是列出样品采集的一般指南。所有样本采集过程中，不得使用叠氮钠做为防腐剂。
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
4. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
注：标本溶血会影响检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
信帆生物供应谷草转氨酶（AST)科研检测服务
原创作者：上海信帆生物科技有限公司
