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技术文章
小鼠孕酮（PROG）ELISA检测试剂盒使用操作步骤
点击次数：420 发布时间：2026/7/16 13:18:09
小鼠孕酮（PROG）ELISA检测试剂盒使用操作步骤
信帆生物主营产品: 质控样品，干扰物质，抗体抗原，elisa试剂盒，动物血制品，生化试剂盒等。实验代做服务：HE染色/特殊染色/技术服务、免疫组化实验服务、Western blotting实验服务、RT-PCR实验技术服务,QPCR(荧光定量PCR）、酶联免疫ELISA、生化测试、液相气相检测等。
产品名称：小鼠孕酮（PROG）ELISA检测试剂盒
规格：48T/96T
保存条件：2-8℃
有效期：6个月
用途：本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中小鼠孕酮（PROG）的含量。
【检验原理】
试剂盒采用酶联免疫分析方法。采用生物素标记PROG，纯化的抗PROG抗体包被微孔板，在竞争抑制反应中，一定量的固相抗体与生物素标记PROG及非标记抗原（校准品或标本）进行抑制竞争反应，抗体与生物素标记的PROG结合量受非标记抗原量所抑制，非标记抗原量多,抗体与生物素标记的PROG结合就少，反之结合就多；反应平衡后，形成固相抗体-生物素化PROG，再加入酶标记的亲和素，形成固相抗体-生物素化PROG-酶标-亲合素复合物。经加底物显色后，用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值）。随着PROG浓度的升高，OD值逐渐下降呈良好的线性关系。本试剂盒具有灵敏度高、特异性强、重复性好、操作简单、快速等特点，对血清中PROG的减少或升高有可靠的检出性能。
【检验方法】
试剂准备
1、使用前，所有的组分都要至少复温30min，确保充分复温到室温。
2、浓缩洗涤液：从冰箱取出的浓缩洗涤液，会有结晶产生，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解。浓缩洗涤液与蒸馏水，按1:20稀释，即1份的浓缩洗涤液，添加19份的蒸馏水。
操作程序
1. 将各种试剂移至室温平衡两小时，取浓缩洗涤液，根据当批检测数量，用蒸馏水1：20稀释，混匀后备用。
2. 将预包被板从密封袋中取出，设一个空白对照孔，不加任何液体；每个校准品设2孔，每孔加入对应校准品50μl；其余每个检测孔直接加待测血清或质控样品50μl。
3. 除空白孔外所有孔加入生物素化抗原50μl，混匀，贴上封板膜，置37℃温育60分钟。
4. 手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置10秒甩干，重复3次后拍干。洗板机洗板：选择洗涤3次程序洗板后拍干。
5. 每孔加入酶标亲合素50μl（空白对照孔除外），混匀，贴上封板膜，置37℃温育30分钟。
6. 手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置10秒甩干，重复3次后拍干。洗板机洗板：选择洗涤3次程序洗板后拍干。
7. 每孔加显色剂A 50μl，显色剂B 50μl，振荡混匀后，置37℃避光显色15分钟，每孔加终止液50μl。
8. 用酶标仪读数，取波长450nm，先用空白对照孔调零点，然后测定各孔光密度值（OD值）。
原创作者：上海信帆生物科技有限公司
