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肺微血管内皮细胞总RNA
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更新日期：2026/8/24 23:48:28
生 产 地：美洲
产品型号：
商家名片
邓*
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相关标签：肺微血管内皮细胞总RNA
详细内容
肺微血管内皮细胞总RNA细胞术检测样品制备方法
A. 直接标记抗体（FITC标记抗体）：
（1） 收集1×106个细胞，800rpm离心5min，4℃以上冷PBS洗一次。
（2） 用4%多聚甲醛1ml室温固定40分钟，800rpm离心5min去上清。加2ml PBS重悬洗涤细胞，800rpm离心5min。
（3） 用1ml含5% 人血清的 PBS 重悬细胞，冰上孵育10min，800rpm离心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和饱和剂量的荧光标记抗体（5×105个细胞/20ul抗体）的PBS ,避光冰上放置30min,离心弃上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定，待测即可。
（4） 用流式细胞仪检测荧光值,每管计数10 000个细胞。[2]
B. 未标记抗体间接免疫荧光标记法：
（1）收集2×106个细胞，用冷的PBS 2ml 洗涤细胞一次，800rpm离心5min。
（2）用2ml 4%多聚甲醛室温固定细胞40min,800rpm离心5min；2ml PBS重悬细胞，800rpm离心5min；
（3）用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重悬细胞，冰上放置10min,800rpm离心5min。
（4）加入饱和剂量未标记抗体，冰上放置40min,800rpm离心5min，用2ml冷的PBS 重悬细胞，800rpm离心5min，洗去未结合一抗，重复一次。
（5）加入荧光标记（FITC）标记的二抗，冰上避光放置40min后，800rpm离心5min，去上清，PBS洗涤两次。
肺微血管内皮细胞总RNA
