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ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在临床上得到了广泛的应用，但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大，如不注意，有可能导致显色不全、花板等结果。

检测（－－SEA）基因总的灵敏度、特异度、准确度、阴性预测值（NPV）、阳性预测值（PPV）和诊断效率（EDF）（分别为98％，97．5％，98．9％，98％，100％和98．9％）与后者相比（分别为98．7％，98．37％，99．2％，98．7％，100％和99．2％），差异无统计学显著性意义（P均>0．9）

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◇ 液体类标本

标本必须为液体，不含沉淀。包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血浆。每个标本量收集体积＝100ul×检测种类。取材前须向销售人员索要说明书。

◇ 血清：

室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。

◇ 血浆：

应根据试剂盒的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，加入10％（v ）抗凝剂（0.1M柠檬酸钠或1%heparin或2.0%EDTA.Na2）混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。

◇ 尿液、胸腹水、脑脊液：

用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。

◇ 细胞培养上清：

检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2⁻⁷.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

◇ 组织标本：

切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，缓冲液中可加入1μg/L蛋白酶抑制剂或50U/ml的Aprotinin（抑肽酶）。用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清置于-20度或⁻⁷0度保存，如有必要，可以将样品浓缩干燥。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

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