企业档案
会员类型：旗舰版
已获得阿仪网信誉 等级评定
(0 -40)基础信誉积累，可浏览访问
(41-90)良好信誉积累，可接洽商谈
(91+ )优质信誉积累，可持续信赖
阿仪网旗舰版会员：15年
工商认证 【已认证】
最后认证时间：
注册号：**** 【已认证】
法人代表： 【已认证】
参观次数：12424753
手机网站：http://wap.app17.com/c71762/
旗舰版网址：http://www.yijishiye.net
生化试剂
- 测试盒类
- 培养基类
- 其他生化试剂
- 缓冲剂
- 表面活性剂
- 分离材料及耗材
- 维生素类
- 色素类
- 植物激素及核酸类
- 抗生素类
- 蛋白质类
- 酶类
- 氨基酸类
- 碳水化合物类
- 现配标准溶液
- 标准品
- 多肽
- 抗体
- 染色
- 树脂
- 微生物快速检验测试片
试剂盒
- 其他Elisa试剂盒
- 大鼠Elisa试剂盒
- 人Elisa试剂盒
- 猴Elisa试剂盒
- 牛ELISA试剂盒
- 鱼Elisa试剂盒
- 山羊Elisa试剂盒
- 植物Elisa试剂盒
- 兔Elisa试剂盒
- 豚鼠Elisa试剂盒
- 猪Elisa试剂盒
- 鸡Elisa试剂盒
- 犬Elisa试剂盒
- 小鼠Elisa试剂盒
- 教学试剂盒
- 鸭ELISA试剂盒
- 马Elisa试剂盒
- 其他试剂盒
热销产品2
折光仪
现货产品
实验室仪器
细胞
热销产品
技术文章
Bradford法蛋白浓度测定试剂盒
点击次数：3895 发布时间：2020/7/7 11:09:47
Bradford法蛋白浓度测定试剂盒
产品简介：
考马斯亮兰G-250染料，在酸性溶液中与蛋白质结合，使染料的最大吸收峰的位置（Imax），由465nm变为595nm，在一定的浓度范围内，测定的吸光度值A595与蛋白质浓度成正比。Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响，样品中巯基乙醇的浓度可高达1M，二硫苏糖醇的浓度可高达5mM，但受略高浓度的去垢剂影响，需确保SDS的浓度低于0.1%，Triton X-100低于0.1%，Tween 20, 60, 80低于0.06%。含去垢剂的样品推荐使用索莱宝生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒。
操作说明：
一．微孔酶标仪法 1. 完全溶解蛋白标准品，取10ul，稀释至250ul ，使终浓度为0.2mg/ml。待测蛋白样品在什么溶液中，标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见，也可以用0.9%NaCl或PBS稀释标准品。 2. 5×G250染色液使用前请颠倒3-5次混匀，取1ml 5×G250染色液，加入4ml双蒸水，混匀成1×G250染色液，此1×G250染色液可在4℃保存一周。 3. 将标准品按0,2,4,6,8,12,16,20微升分别加到96孔板中，加PBS稀释液补足到20微升。 4. 将样品作适当稀释（最好多做几个梯度，如作2倍、4倍、8倍稀释），加20微升到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时的误差，标准线前面的点可能不很准确，所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。 5. 各孔加入200微升稀释后的1×G250染色液，室温放置3-5分钟。 6. 用酶标仪测定A595，或560-610nm之间的其它波长的吸光度。 7. 根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。 二．分光光度计法 如无酶标仪，染色反应可在离心管中进行，反应液混匀后加入比色皿中，使用分光光度计测定吸光值。步骤如下： 1. 取八支（或者更多）干净的10ml离心管，标记上号。 2. 取100ulBSA加入PBS 2.4ml稀释至终浓度为0.2mg/ml。 3. 5×G250染色液使用前请颠倒3-5次混匀，取10ml 5×G250染色液，加入40ml双蒸水，混匀成1×G250染色液，此1×G250染色液可在4℃保存一周。
4. 按下表加入试剂(以每孔5ml计，多余的用来清洗比色皿)
| 离心管号 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7（样品管1） | 8（样品管2） | 9（样品管3） |
| 标准蛋白BSA | 0ul | 100ul | 200ul | 300ul | 400ul | 500ul | 500ul适当稀释的样品1 | 500ul适当稀释的样品2 | …… |
| PBS | 500ul | 400ul | 300ul | 200ul | 100ul | 0ul | 0ul | 0ul | 0ul |
| 1XG250染色液 | 5ml | 5ml | 5ml | 5ml | 5ml | 5ml | 5ml | 5ml | 5ml |
5. 反应3分钟后测OD值。为了实验的准确性，可每间隔2分钟加一管染色液，每间隔2分钟测一管OD值。如下表：
| 离心管号 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | …… |
| 加染色液（分钟） | 0 | 2 | 4 | 6 | 8 | 10 | 12 | 14 | …… |
| 测OD值 | 3 | 5 | 7 | 9 | 11 | 13 | 15 | 17 | …… |
此图为伯乐酶标仪680，单波长，570nm测得。室温反应三分钟
注意：
1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
原创作者：上海一基实业有限公司
