标准品
合成订制
ELISA试剂盒
- 人ELISA试剂盒
- 动物ELISA试剂盒
- 植物ELISA试剂盒
- 小鼠ELISA试剂盒
- 裸鼠ELISA试剂盒
- 仓鼠ELISA试剂盒
- 豚鼠ELISA试剂盒
- 猪ELISA试剂盒
- 鸡ELISA试剂盒
- 鸭ELISA试剂盒
- 绵羊ELISA试剂盒
- 猴ELISA试剂盒
- 骆驼ELISA试剂盒
- 马ELISA试剂盒
- 山羊ELISA试剂盒
- 鹿ELISA试剂盒
- 兔子ELISA试剂盒
- 鱼ELISA试剂盒
- 大鼠ELISA试剂盒
食品卫生监测培养基
培养基
- 中国药典培养基
- 美国药典培养基(USP标准)
- 欧洲药典培养基(EP标准)
- 细菌总数检测，增菌培养基
- 大肠杆菌及肠杆菌科检测培养基
- 沙门氏菌、志贺氏菌检验培养基
- 金黄色葡萄球菌检测培养基
- 酵母、霉菌检测培养基
- 乳酸菌、双歧杆菌检测培养基
- 弧菌检测培养基
- 李斯特氏菌检测培养基
- 溶血性链球菌检测培养基
- 阪崎肠杆菌检验培养基
- 产气荚膜梭菌、肉毒梭菌、厌氧菌检验培养基
- 弯曲杆菌检验培养基
- 小肠结肠炎耶尔森氏菌检验培养基
- 支原体检测培养基
- 军团菌检测培养基
- 啤酒检验培养基
- 无菌检验培养基
- 植物细胞培养基
- 动物细胞培养基
- 化妆品检测培养基
- 药品、生物制品检测培养基
- 饮用水及水源检测培养基
- 罐头食品商业无菌检测培养基
- 饲料微生物检测培养基
- 一次性卫生用品卫生检测培养基
- 维生素检测培养基
- 四环素检定、厌氧亚硫酸盐还原杆菌检测培养基
- 菌种保存培养基
- 临床培养基
- 显色培养基
- 一次性培养基平板
- 即用型液体培养基
- 管装培养基
- 微生物生化管
- 微生物配套试剂
- 抗生素药敏纸片
- 微生物快速检验测试纸片
动物血清
进口特级血清
Peprotech细胞因子
生物试剂
通用试剂
其他检测方法试剂盒
菌株
抗体
- McAb 一抗
- McAb 二抗
- PcAb一抗
- PcAb二抗
- HRP标记一抗
- HRP标记二抗
- 胶体金标记一抗
- 胶体金标记二抗
- 小分子抗原
- 动物Ig类抗原
- 天然纯化抗原
- HRP标记抗原
- 免疫分析科研试剂盒
- 免疫分析相关试剂
- 细胞培养用材料和试剂
- 单抗、多抗研制用材料
- 抗体纯化试剂与试剂盒
- 抗体标记试剂与试剂盒
- 半抗原的偶联试剂与试剂盒
- 免疫学检测用血清与抗血清
抗生素
联系我们
联系人：赵先生
资料下载
RNA琼脂糖凝胶电泳实验操作步骤与注意事项
详细内容下载：
文件大小：4kb
上传时间：2013/1/11 12:28:48
文件类型：jpg
上 传 者：上海士锋生物科技有限公司
查看次数：422次
下载次数：119次
1%的RNA琼脂糖凝胶电泳可以用来检测RNA的完整性，本实验的主要目的是熟悉植物总RNA非变性胶电泳操作原理和操作方法与步骤。
一、实验目的
掌握植物总RNA非变性胶电泳的原理和方法。
二、实验原理
RNA电泳可以在变性及非变性两种条件下进行。非变性电泳使用1.0%－－1.4%的凝胶，不同的RNA条带也能分开，但无法判断其分子量。只有在完全变性的条件下，RNA的泳动率才与分子量的对数呈线性关系。因此要测定RNA分子量时，一定要用变性凝胶。在需快速检测所提总RNA样品完整性时，配制普通的1%琼脂糖凝胶即可。
三、实验材料、器具及药品
蘑菇的总RNA溶液。 电泳仪，电泳槽，电子天平，移液器，枪头，微波炉，紫外透射检测仪等。 琼脂糖，1XTAE电泳缓冲液，0.5μg/ml溴化乙锭（EB）10X载样缓冲液。
四、实验步骤
（1）用1×TAE电泳缓冲液制作琼脂糖凝胶，加1×TAE电泳缓冲液至液面覆盖凝胶。
（2）在超净工作台上，用移液器吸取总RNA样品4μl于封口膜上。在实验台上再加入5μl 1×TAE电泳缓冲液及1μl 的10X载样缓冲液，混匀后，小心加入点样孔。
（3）打开电源开关，调节电压至100V，使RNA由负极向正极电泳，约30min后将凝胶放入EB染液中染色5min,用清水稍微漂洗。在紫外透射检测仪上观察RNA电泳结果。
RNA的变性琼脂糖凝胶检测
试剂：
（1）MOPS缓冲液（10*）:0.4mol/L 吗啉代丙烷磺酸（MOPS） （Ph7.0），0.1mol/L NaAc, 10mol/L EDTA。
（2）上样染料：50%甘油，1mmol/L EDTA ,0.4%溴酚蓝，0.4%二甲苯蓝。
（3）甲醛。
（4）去离子甲酰胺。v电泳槽清洗：去污剂洗干净（一般浸泡过夜）——水冲洗——乙醇干燥——3%H2O2灌满——室温放置10分钟——0.1%DEPC水冲洗。
操作：
（1） 将制胶用具用70%乙醇冲冼一遍，晾干备用。
（2） 配制琼脂糖凝胶。
①称取0.5g琼脂糖，置干净的100ml 锥形瓶中，加入40ml蒸馏水，微波炉内加热使琼脂糖彻底溶化均匀。
②待胶凉至60－－70 ℃，依次向其中加入9ml 甲醛、5ml 10X MOPS缓冲液和0.5ul 溴化乙锭，混合均匀。
③灌制琼脂糖凝胶。
（3） 样品准备：
① 取 DEPC处理过的500ul小离心管，依次加入如下试剂： 10x MOPS缓冲液2ul，甲醛3.5ul,甲酰胺（去离子）10ul，RNA 样品 4.5ul,混匀。
② 将离心管置于60℃水浴中保10分钟，再置冰上2分钟。
③ 向管中加入3ul 上样染料，混匀。
（4）上样。
（5）电泳：电泳槽内加入1XMOPS缓冲液，于7.5V/ml 的电压下电泳。
（6）电泳结束后，在紫外灯下检查结果。
小结：RNA琼脂糖凝胶电泳中务必去除RNASE酶的污染，所有的试剂需用DEPC水配制，所用的器材也要的DEPC处理并灭菌，防止RNA被降解。
相关文章
- 2013/5/30大鼠白细胞介素6（IL-6）elisa试剂盒操作说明书
- 2013/4/2人白细胞介素23(IL-23)酶联免疫分析(ELISA)
- 2013/1/11RNA琼脂糖凝胶电泳实验操作步骤与注意事项
- 2012/11/30兔超敏C反应蛋白(hs-CRP)elisa试剂盒
- 2012/11/28鸡白细胞介素2(IL-2)酶联免疫分析(ELISA)说明书
- 2012/11/19小鼠山梨醇脱氢酶(SDH)elisa试剂盒说明
- 2012/11/14猪孕激素/孕酮(PROG)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书
- 2012/11/9小鼠免疫球蛋白E(IgE)(ELISA)试剂盒说明书
- 2012/11/7人NADPHY氧化酶酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书
- 2012/11/5猪胰高血糖素样肽1(GLP-1)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书
