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技术文章

ELISA实验中不同样本的处理方法你知道吗

点击次数：3722 发布时间：2021/3/17 11:01:14

近日，武汉大学位大新生在我司购买了elisa试剂盒，并在电话中咨询了ELISA试剂盒所需要样本处理及要求。为了让更多的人了解，我司特在此为您做出如下分析：

关于血清：

室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。在血浆上，应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右 （2000-3000转/分）去除颗粒。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。 尿液则用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

细胞培养上清

检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清 。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

组织标本

切割标本后，称取重量。加入定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后份待检测，其余冷冻备用。

注意：标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.。不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

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