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技术文章

解析细胞培养常见问题和解决方法

点击次数：3648 发布时间：2020/5/26 8:48:09

细胞培养技术是指在动植物体外生长,并不再形成组织。培养物一般为细胞群,也可以是单个细胞,近年来,其已经成为很多生物制品的主要材料,并广泛应用于医学病理研究,本文针对细胞培养存在的一些常见问题进行分析研究并提出相应防控措施,恒远免疫学现总结如下。


问题1：培养液pH值变化太快
可能原因：
（1）CO2张力不对
（2）培养瓶盖拧得太紧
（3）NaHCO3缓冲系统缓冲力不足
（4）培养液中盐浓度不正确
（5）细菌、酵母或真菌污染

建议解决方法：
（1）按培养液中NaHCO3浓度增加或减少培养箱内CO2浓度，2.0g/L到3.7g/L浓度NaHCO3对应CO2浓度为5%到10%。
（2）松开瓶盖1/4圈。
（3）改用不依赖CO2培养液。加HEPES缓冲液至10到25mM终浓度。
（4）在CO2培养环境中改用基于Earle′s盐配制的培养液，在大气培养环境中培养改用Hanks盐配制的培养液。
（5）丢弃培养物，或用抗生素除菌。

问题2：培养液出现沉淀，但pH值不变
可能原因：
（1）洗涤剂清洗后残留有磷酸盐，将培养基成分沉淀下来
（2）冰冻保存培养液

建议解决方法：
（1）用去离子水反复冲洗玻璃器皿，然后灭菌。
（2）将培养液加热到37℃，摇动使其溶解如沉淀仍然存在，丢弃培养液。

问题3：培养液出现沉淀，同时pH发生变化
可能原因：
细菌或真菌污染

建议解决方法：
丢弃培养物，或用抗生素除菌。

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