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技术文章

提取牛血清白蛋白及储存的精妙办法

点击次数：4059 发布时间：2020/1/7 8:43:12

提取办法：

1、盐析

取小牛血清0.5ml+PBS液0.5ml+饱和硫酸铵2.3ml，充分殽杂匀称，静置20min，2500r/min 离心10min。

2、透析

取玻璃纸一张，折成袋形，将离心后的上清液倒入袋内，用线扎紧上口（过细要留有清闲），放入有自来水的小烧杯中透析，要不断震动，每隔2min换一次水，换15次。放入试管待用。

3、准备与电泳

（1）取两条2.5cm x 8.0cm 的膜条，将膜条无光辉面向下，放入作育皿中的巴比妥缓冲液中冲锋渗透。

（2）将充分渗透的两条膜条取出，用干净滤纸吸去多余的缓冲液，以醋纤膜的光辉面距一端1.5cm处作为点样线，并用铅笔在上面编好号①②。

（3）用两个点样器分别在标准液和测定液中櫵一下，点样器下端粘上薄层标准液和样液，然后将点样器竖直，举行点样。

（4）电泳 将点样后的膜条置于电泳槽架上，组织时点样面向下（无光辉面），点样端置于阴极，膜条与滤纸贴紧，待平衡5min后，即可通电。调治电泳仪，使南北极间距的电压为15v/cm，电流0.4~0.6Ma/cm膜条，通电50分钟封闭电源。

（5)通电结束后，用镊子取出膜条，直接浸于盛有氨基10B的染色 液中，染2min取出，立刻浸于漂洗液中，分别在漂洗液中各漂洗5min，直至布景漂净为止。用干滤纸吸干薄膜。

（6）观察两张薄膜的色彩。

储存办法：

每10克加100毫升水进行溶解，或用 PBS溶解也可，视用处而决议。然后分装成小支。若不运用防腐剂可储存在零下20或30摄氏度的恒温柜中，若运用防腐剂则可储存在零上4摄氏度的环境下。

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