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ELISA试剂盒竞争法测抗原的操作小秘诀（带图解）

点击次数：4546 发布时间：2018/4/25 11:40:25

我公司热销全国的优质试剂盒采用ELISA方法，主要作用有：①免疫酶染色各种细胞内成份的定位；②显现微量的免疫沉淀反应；③定量检测体液中抗原或抗体成份；④研究抗酶抗体的合成。ELISA实验方法也可以分有多种类型，今天上海恒远公司为您带来了最新技术资讯，下面一起来看看elisa试剂盒竞争法测抗原的操作小秘诀！

1.包被抗体：用包被缓冲液稀释特异性抗体球蛋白至最适浓度（1～10μg/ml），每凹孔加0.3ml，4℃过夜，或37℃水浴3小时，贮存冰箱。

2.洗涤：移去包被液，凹孔用洗涤缓冲液（含0.05%吐温-20）洗3次，每次5分钟。

3.分2组，a组加酶标记抗原和被检抗原混合液0.2ml，b组只加酶标记抗原液0.2ml，37℃作用1～2小时。（混合液可作成不同稀释度）

4.洗涤：移去包被液，凹孔用洗涤缓冲液（含0.05%吐温-20）洗3次，每次5分钟。

5.加入0.2 ml底物溶液于每个凹孔（OPD或OT），室温作用30分钟（另作一空白对照，0.4ml底物加0.1ml终止剂）。

6.加终止剂：每凹孔加2M H2SO4或2M柠檬酸0.05ml。

7.用酶标比色计测定a、b两组OD值，并求出a、b、OD值的差数。

本方法首先将特异性抗体吸附于固相载体表面，我们把抗原和抗体吸附到固相载体表面的这个过程，称为包被，也可叫做致敏。经洗涤后分成两组：一组加酶标记抗原和被测抗原的混合液，而另一组只加酶标记抗原，再经孵育洗涤后加底物显色，这两组底物降解量之差，即为我们所要测定的未知抗原的量。

这种方法所测定的抗原只要有一个结合部位即可，因此，对小分子抗原如激素和药物之类的测定常用此法。该法的优点是快，因为只有一个保温洗涤过程。但需用较多量的酶标记抗原为其缺点。

ELISA竞争法测抗原示意图：

以上技术内容供大家参考学习，如有不太清楚的地方或了解更多，可以随时联系到我公司咨询详情。上海恒远公司为大家供应优质TSZ、R&D、BIM品牌进口ELISA试剂盒，提供全程技术指导及免费代检测服务。

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上海恒远生物技术发展有限公司隶属于上海恒远生物科技有限公司于2008年成立，是一家生物高新技术企业，主要从事免疫学、分子生物学和常规生化试剂的研发及销售。主要产品有进口BIM/RD/TSZ elisa试剂盒、elisa试剂盒价格、国产elisa试剂盒、进口elisa试剂盒、放免试剂盒、血清、抗体、生物科研试剂、实验耗材等。

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