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技术文章

BIM小课堂:ELISA试剂盒实验OD值的范围?

点击次数:4600 发布时间:2016/10/18 10:37:19

elisa试剂盒实验OD值是optical density(光密度)的缩写,表示被检测物吸收掉的光密度,是检测方法里的专有名词,检测单位用OD值表示,1OD=1og(1/trans),其中trans为检测物的透光值。 光通过被检测物,前后的能量差异即是被检测物吸收掉的能量,特定波长下,同一种被检测物的浓度与被吸收的能量成定量关系。
ELISA试剂盒实验最后步骤中OD值的范围也是有一定讲究的,不容小觑。说到OD值范围,我司业务员在售后问题的处理过程中也常会有客户咨询其范围是多少。其实是不一定的,我们以AβELISA为例,2以上就会偏饱和,变化不容易做出来,所以一般把model组控制在0.8-1.5,而control组的话基本跟空白差不多,不到0.1。
所以,一般情况下我们会建议先做个标曲以及样品的梯度稀释,然后选择在标曲中间位置的样品稀释度作为以后的参照稀释度。
同时,也与使用的detector有关,detector有自己的检测范围和线性范围。如果实验室使用的仪器,说明书上说检测范围是0~4,线性范围是0~3,但我们自己的实验结果显示最好的线性范围是0~2OD。如果只检测空白的没有经过处理的Elisa孔,大致在0左右。
HIV抗体ELISA法测定中空白OD值大于阴性对照OD值是什么原因,单波长下和双波长下测定无明显改变空白做的是试剂空白,不加酶,只加显色剂和终止液,阴性对照是试剂盒提供的不用稀释。450nm下测定和450/630nm下测定空白,没明显差别。

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