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技术文章

ELISA实验加样步骤常出现的问题及解决方法

点击次数：3936 发布时间：2015/11/23 10:58:51

elisa试剂盒实验现已普遍运用于科研领域，具有灵敏度较高、特异性较好的特点，操作中的各个环节操作都很关键，稍有不当可能会对实验的检测结果有影响，导致显色不全、花板等结果。现我公司技术人员将加样操作中常出现问题的原因及解决办法总结于下，以便给做实验的你们带来一些启发，提高试验质量：
加样 可能原因：
1）血清或血浆标本分离不好即进行加样；
2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长（特别是室内温度较高时）；
3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法：
1） 标本为血清：最好将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒采血管混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。
2） 加样后及时放入孵箱。
3） 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4） 如果采用AT或其他全自动加样，最好选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5） 标本较多时，请分批操作。
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