微生物过氧化氢酶（CAT）ELISA试剂盒实验原理及注意事项_技术交流_技术文章

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微生物过氧化氢酶（CAT）ELISA试剂盒实验原理及注意事项

点击次数：4021 发布时间：2015/11/12 9:58:57

最近咨询微生物试剂盒的客户还挺多的，在10月底的时候已经有好几个客户在我司订购了几个微生物elisa试剂盒，在订购微生物试剂盒之前有的客户问到实验过程中应注意哪些问题，下面是我司钱经理为客户提供的微生物试剂盒注意事项。

微生物过氧化氢酶（CAT）ELISA试剂盒实验原理：

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中过氧化氢酶（CAT）水平。用纯化的过氧化氢酶

（CAT）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入过氧化氢酶（CAT），

再与HRP 标记的过氧化氢酶（CAT）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底

洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最

终的黄色。颜色的深浅和样品中的过氧化氢酶（CAT）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长

下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中过氧化氢酶（CAT）浓度。

微生物过氧化氢酶（CAT）ELISA试剂盒注意事项：

1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未

用完，板条应装入密封袋中保存。

2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好

控制在5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD 值

大于标准品孔第一孔的OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计

算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。

5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物请避光保存。

7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9．本试剂不同批号组分不得混用。

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