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ELISA实验洗涤次数法则总结方案
点击次数:1122发布时间:2014/5/19 10:53:22
在ELISA实验中的操作步骤里,其中有一项洗涤。整个实验看起来非常简单,但是在实际操作过程中,也不能掉以轻心,还是应该仔细检查洗涤步骤,才能获得准确的结果。
ELISA实验洗涤次数法则总结方案:
洗涤次数越多,背景越低。太多次的洗涤会降低信号强度,使其难以测定。通常的做法是在每次抗体或抗原孵育后重复洗涤三次。不过,ELISA板的制造商会对洗涤次数提出建议。一般而言,制造商包被平板需要的洗涤次数比用户包被的平板要少。对于用户包被的ELISA板,必须优化洗涤次数。还有一些参数会影响洗涤步骤的效果。这些参数包括吸液高度和吸入位置,这两者都能调整,以降低背景(残留量)和差异。残留液体中包含未结合的抗原或抗体,它们会增加背景信号。残留量越小,残留液体越少,转移到下一步的干扰液体也就越少。
吸液高度会明显影响残留量;如果洗涤吸头与反应孔底部的距离稍大,那就会让残留量急剧增加。反之,如果洗涤吸头压着反应孔底部,那么也会使吸液效率降低,残留量增加。
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