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动态监测细胞重塑诱导转化生长因子-β1
点击次数：1625发布时间：2012/9/11 9:21:05
可塑性成年细胞的分化可能有巨大的治疗潜力，但在同一时间，它的特点是发展的严重的病理状态，如癌症和纤维化。在这项研究中，我们报告中的应用无创性系统的实时动态监测细胞的可塑性。分析细胞阻抗剖面记录细胞指数使用实时细胞分析仪发现其显着增加治疗后前列腺上皮细胞的转化生长因子-β1。变化的细胞指数剖面平行细胞骨架改建和诱导上皮细胞–间过渡和细胞增殖的负相关。这种新颖的应用这种方法表现出极大的潜力的阻抗为基础的系统的无创性和实时监测细胞的命运。
关键词：实时细胞分析细胞可塑性上皮间质转型- -–转化生长因子-β1 - F -肌动蛋白细胞骨架重构
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景区简介
这一现象的可塑性成年细胞的分化可能有巨大的治疗潜力，但在同一时间，它的特点是严重的病理状态恶化。上皮间过渡–（IMT）是一个关键过程的胚胎发育，但它也发生在进展肿瘤来源于上皮细胞（审查，见（1））。转化生长因子- 1（ββ转化生长因子- 1）是一个重要的生长因子诱导重塑的上皮细胞。转化生长因子-β1诱导一个复杂的变化的基因表达谱，从而导致诱导细胞周期阻滞，增加细胞迁移，扩散（2–4）。一般来说，确定质量和数量的重构的上皮细胞是一个复杂的问题。它通常包括定量表达的上皮细胞和间质标记（E -钙粘蛋白，神经钙粘着蛋白，波形蛋白和），可视化骨架重建（F），迁移，入侵检测（伤口愈合和移民通过基底膜基质；（5））。传统上，大多数的方法是根据费时终点状态分析整个细胞群，结合先进的技术分析单个细胞，利用流式细胞仪或数字显微技术和图像分析。然而，无论是情节和空间分辨率这些技术能够登记非常小的、快速的细胞形态的变化。目前，标记和无创性方法的基础上的电子传感器阵列细胞提出了监测细胞生理学，尤其是粘附，传播，和瞬态变化，细胞形态（6–9）。广泛接受这一方法，正确和准确地解释这些数据的测量是至关重要的获得精确的相关性细胞形态和表型相关的整体使用参考方法。然而，良好的描述模型应用这一方法，不同的细胞系和各种细胞的可塑性调节的条件是失踪。在这里，我们表明，阻抗为基础的实时细胞分析仪（美）允许动态监测和定量细胞重塑在转化生长因子- 1在β上皮转化前列腺上皮细胞。这种新颖的应用这种方法表现出极大的中型吞吐量潜力的阻抗为基础的系统的无创性和实时监测细胞的命运。
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材料与方法
细胞的
1细胞取自德国微生物和细胞培养和培养在1640培养，辅以20%胎牛血清（两部分），5 µ克/毫升5毫微克/毫升的转铁蛋白，亚，和5 µ克/毫升胰岛素（公司）。该细胞系培养情报（热费科学）培养瓶，盘菜，在加湿的孵化器在37摄氏°大气中5%的二氧化碳。
实时细胞阻抗分析
协会e-plates®96被用于无创实时测量与使用一个xcelligence时系统包括一软件版本1.1（包括罗氏）。第一，标准的背景进行测量是利用100μ我完整的栽培介质。1细胞培养，量化，和种子中额外的100μ我种植媒体在终浓度为30000细胞每平方厘米。细胞不断监测每1分钟在第一个45分钟后播种，每1小时为96小时内重组转化生长因子-β1（微孔）处理不同浓度一式三份进行24小时后播种的细胞。形成收缩微丝阻断细胞松弛素乙（炭黑），用dematioideum（calbiochem）溶解在甲醇
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