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当前位置:阿仪网>上海恒远生物科技有限公司>技术文章>恒远生物|小鼠T淋巴细胞 CTLL-2 培养攻略

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恒远生物|小鼠T淋巴细胞 CTLL-2 培养攻略

点击次数:2550 发布时间:2025/3/12 9:43:48

一、细胞基本信息

品牌名称: 恒远生物

产品货号: HYCC20033

细胞名称:CTLL-2

中文名称:小鼠T淋巴细胞

种属来源:小鼠

组织来源:T细胞

细胞形态:淋巴母细胞样

生长特性:悬浮生长

二、培养条件

气相:95%空气,5%二氧化碳

温度:37℃

三、培养基与添加物

基础培养基:RPMI-1640

添加物:10%特级胎牛血清(FBS)、100U/ml(或100IU/ml)IL-2、1%青霉素/链霉素(P/S)

注意,有些培养体系可能略有不同,但核心成分通常包括RPMI-1640、FBS和IL-2。

四、细胞培养步骤

1. 细胞复苏

从液氮罐或-80℃冰箱中取出冻存管,迅速放入37℃水浴中摇晃解冻。

将解冻后的细胞悬液移至含5ml完全培养基的离心管中,1000rpm离心5min。

弃去上清液,补加5mL完全培养基后吹匀,接种于T25培养瓶中(或6cm皿中),培养过夜。

第二天换液并检查细胞密度。

2. 细胞传代

当细胞密度达到80%-90%时,进行传代培养。

离心收集细胞(1000rpm,5-8min),弃去上清液。

补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2的比例分到新的含5-6mL完全培养基的T25培养瓶中或6cm培养皿中。

对于较难培养的细胞或新手,可采用竖瓶培养法,逐步补加完全培养基,待细胞密度升高后再进行传代。

3. 细胞冻存

选择生长状态良好的细胞进行冻存。

离心收集细胞(1000rpm,5-8min),去除上清液。

按冻存数量加入无血清细胞冻存液,轻轻混匀后,分装入冻存管中(每管约1mL细胞悬液)。

将冻存管放入-80℃冰箱中过夜,然后转入液氮罐中储存。

五、培养注意事项

细胞接收与检查:收到细胞后,首先检查细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有异常,请及时与我司(恒远生物)联系。

无菌操作:在细胞培养过程中,应严格遵守无菌操作规程,避免细胞污染。

细胞密度监控:定期观察细胞生长情况,及时传代以避免细胞密度过高导致死亡。

培养基更换:根据细胞生长情况和培养基颜色变化,适时更换新鲜培养基。

六、售后服务与细胞保存

若细胞在运输或培养过程中出现问题,应及时与我司联系并提供相关证据(如细胞照片、操作记录等),以便进行售后处理。细胞应储存在液氮罐中,避免反复冻融以确保细胞活性。

上海恒远生物科技有限公司拥有自己的实验室,备有专业的技术研发团队,于各种生物试剂,细胞,血清,ELISA试剂盒的研发与销售,实验提供免费代测服务,并提供精湛的技术服务,如果您有实验上的问题欢迎前来咨询,为您提供专业的一对一技术指导。


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