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恒远高品质抗体试剂的孵育要求

点击次数:3964 发布时间:2014/5/29 10:43:15

近日,有位老师来电到上海恒远咨询抗体试剂的孵育要求问题。对此,我公司技术人员做了一个分析,供您的实验参考,希望会有所帮助。


条件的比较:
1、一抗孵育温度有:4度、室温、37度,其中4度效果最佳;孵育时间:这与温度、抗体浓度有关,一般37度1-2h,而4度过夜和从冰箱拿出后37度复温45min。
2、二抗一般室温或37度30min-1h,具体时间需要摸索。

一抗4度孵育后为什么要进行37度复温?
说法一:防止切片从4度直接放入PBS易脱片;说法二:是使抗原抗体结合更稳定。
一般不需要,但对表达较弱的抗原可能有用,4度和37度时分子运动方式不同,前者分子碰撞机率和运动速度小于后者,后者结合更快,但敏感性也提高了并易造成非特异染色。

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