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发布时间:2015/11/9 14:10:16关注度:341
产品简介:
酯酶主要分为非特异性酯酶(non-specific esterase)、酯酶(lipase)、胆碱酯(choli-esterase)。每一种酯酶常能水解许多不同的底物,多种不同的酯酶又能水解相同的底物,因此这一系列酯酶被称为非特异性酯酶。非特异性酯酶的最适 pH 为 5.0~8.0,定位于溶酶体和内质网,在肝脏、肾脏、胰和小肠具有较高的酶活性。单核-吞噬细胞系统的单核巨噬细胞、树突细胞也含有丰富的非特异性酯酶。
yuanye 酸性α-乙酸萘酚酯酶染色液(ANAE 法)又称非特异性酯酶染色液,其原理是
酸性条件下细胞中的酸性酯酶将α-乙酸萘酚水解产生α-萘酚,α-萘酚再不六偶氮副品红偶联,生成不溶性红色沉淀,定位于细胞质。本染色液对酯酶染色无特异性,故又称作非特异
性酯酶染色液,可用于血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片的非特异性酯酶染色,亦可作氟化
钠抑制试验。该染色液仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
产品组成:
| 编号 名称 | R20444-3*10ml | R20444-3*20ml | Storage | |
| 试剂(A): ANAE 固定液 | 10ml | 20ml | RT 避光 | |
|
试剂(B): ANAE 孵育液 | B1: Pararosaniline solution | 0.05ml | 0.1ml | 4℃ 避光 |
| B2: Nitrite solution | 0.05ml | 0.1ml | 4℃ 避光 | |
| B3: α-NAE solution | 0.5ml | 1ml | 4℃ 避光 | |
| B4: ANAE buffer | 9.5ml | 19ml | RT 避光 | |
| 临用前,按 B1:B2:B3:B4=1:1:10:190 充分混合,即为 ANAE 孵育液,即配即 用。注意应先 B1:B2=1:1 混匀后,再不 B3、B4 混匀。 | ||||
| 试剂(C): 甲基绿染色液 | 10ml | 20ml | RT 避光 | |
| 试剂(D): NaF solution | 0.2ml | 0.4ml | RT 避光 | |
| 使用说明书 | 1份 | |||
自备材料:
1、 载玻片、湿盒
2、 显微镜
操作步骤 (仅供参考) :
1、 血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切入 ANAE 固定液固定 10~15min。
2、 水洗 5min。
3、 入配制好的 ANAE 孵育液,放入湿盒中,室温(15~25℃)避光孵育 1h,水洗。
4、 入甲基绿染色液复染 5~15min,水洗,镜检。
染色结果:
| 细胞质 | 暗红色/棕色 |
| 细胞核 | 绿色 |
氟化钠抑制实验:
按 NaF solution:ANAE 孵育液=25:1 的比例,在 ANAE 孵育液中加入 NaF solution,
其余按上述染色法进行。
注意事项:
1、 血液或骨髓细胞涂片应新鲜,薄厚适宜,一般 2 天内染色,否则会影响酶的活性。
2、 ANAE 孵育液易失效或降低阳性强度,即配即用,不宜久置。
3、 ANAE 孵育液配制后易出现浑浊,但不会影响染色效果。
4、 单核细胞为中度阳性至强阳性,对 NaF 敏感。正常粒细胞呈阴性反应。
5、 每次染色时,应有阳性对照片。
6、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:6 个月有效。
原创作者:上海源叶生物科技有限公司
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