SDS-PAGE 凝胶试剂盒(推荐)
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详细内容
促销产品:SDS-PAGE 凝胶试剂盒(推荐)
促销价格:¥0
原 价:¥150
开始时间:2015/6/18
结束时间:2015/9/30
详细介绍:夏季7折促销
产品简介: 本公司生产的SDS-PAGE凝胶配制试剂盒提供了配制SDS-PAGE凝胶所需的大部分试剂,
用户只需自备制胶器具和蒸馏水,即可配制PAGE胶了。SDS-PAGE凝胶配制试剂盒不仅可用于配制
SDS-PAGE凝胶,也可用于配制非变性PAGE凝胶。
包装清单
| 2xSDS蛋白上样缓冲液(赠品) | 2ml |
| 30%丙烯酰胺混合液 | 100ml |
| 1.5mol/L Tris(pH8.8) | 100ml |
| 1.0mol/L Tris(pH6.8) | 30ml |
| 过硫酸铵 | 0.5g |
| 10% SDS | 5ml |
| TEMED | 0.5ml |
| 说明书 | 一份 |
保存条件:为了保证产品质量,收到试剂盒之后请按如下方式保存:
(1)10% SDS和TEMED(避光)室温保存。10%SDS如有沉淀析出,37℃加热溶解即可。
(2)30%丙烯酰胺混合液、2×SDS蛋白上样缓冲液、1.5mol/L Tris(pH8.8)、1.0mol/L Tris(pH6.8),4℃保存。
(3)过硫酸铵用5ml双蒸水溶解配制成10%溶液后,分装成小管-20℃保存,通常半年内有效。
10%过硫酸铵水溶液在室温状况下不稳定,4℃可以保存3-5天。
注意事项
10%过硫酸铵水溶液不太稳定,需注意存放条件和时间限制。如发现凝胶聚合不好,应更换配制的过硫酸铵溶液。
使用说明:根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度,再按照下面的表格配制SDS-PAGE的分离胶(即下层胶)。
SDS-PAGE分离胶的浓度与最佳分离范围:
| SDS-PAGE分离胶浓度 | 最佳分离范围 |
| 6%胶 | 57-212kD |
| 8%胶 | 36-94kD |
| 10%胶 | 20-80kD |
| 12%胶 | 12-60kD |
| 15%胶 | 10-43kD |
配制6%的PAGE分离胶
| 成分 | 所需各成分的体积(毫升) | |||||
| 凝胶体积 | 5 | 10 | 15 | 20 | 25 | 30 |
| 蒸馏水 | 2.6 | 5.3 | 7.9 | 10.6 | 13.2 | 15.9 |
| 30%丙烯酰胺混合液 | 1.0 | 2.0 | 3.0 | 4.0 | 5 | 6.0 |
| 1.5mol/L Tris(pH8.8) | 1.3 | 2.5 | 3.8 | 5.0 | 6.3 | 7.5 |
| 10%SDS | 0.05 | 0.1 | 0.15 | 0.2 | 0.25 | 0.3 |
| 10%过硫酸铵 | 0.05 | 0.1 | 0.15 | 0.2 | 0.25 | 0.3 |
| TEMED | 0.004 | 0.008 | 0.012 | 0.016 | 0.02 | 0.024 |
配制8%的PAGE分离胶
| 成分 | 所需各成分的体积(毫升) | |||||
| 凝胶体积 | 5 | 10 | 15 | 20 | 25 | 30 |
| 蒸馏水 | 2.3 | 4.6 | 6.9 | 9.3 | 11.5 | 13.9 |
| 30%丙烯酰胺混合液 | 1.3 | 2.7 | 4.0 | 5.3 | 6.7 | 8.0 |
| 1.5mol/L Tris(pH8.8) | 1.3 | 2.5 | 3.8 | 5.0 | 6.3 | 7.5 |
| 10%SDS | 0.05 | 0.1 | 0.15 | 0.2 | 0.25 | 0.3 |
| 10%过硫酸铵 | 0.05 | 0.1 | 0.15 | 0.2 | 0.25 | 0.3 |
| TEMED | 0.003 | 0.006 | 0.009 | 0.012 | 0.015 | 0.016 |
配制10%的PAGE分离胶
| 成分 | 所需各成分的体积(毫升) | |||||
| 凝胶体积 | 5 | 10 | 15 | 20 | 25 | 30 |
| 蒸馏水 | 1.9 | 4.0 | 5.9 | 7.9 | 9.9 | 11.9 |
| 30%丙烯酰胺混合液 | 1.7 | 3.3 | 5.0 | 6.7 | 8.3 | 10.0 |
| 1.5mol/L Tris(pH8.8) | 1.3 | 2.5 | 3.8 | 5.0 | 6.3 | 7.5 |
| 10%SDS | 0.05 | 0.1 | 0.15 | 0.2 | 0.25 | 0.3 |
| 10%过硫酸铵 | 0.05 | 0.1 | 0.15 | 0.2 | 0.25 | 0.3 |
| TEMED | 0.002 | 0.004 | 0.006 | 0.008 | 0.01 | 0.012 |
配制12%的PAGE分离胶
| 成分 | 所需各成分的体积(毫升) | |||||
| 凝胶体积 | 5 | 10 | 15 | 20 | 25 | 30 |
| 蒸馏水 | 1.6 | 3.3 | 4.9 | 6.6 | 8.2 | 9.9 |
| 30%丙烯酰胺混合液 | 2.0 | 4.0 | 6.0 | 8.0 | 10.0 | 12.0 |
| 1.5mol/L Tris(pH8.8) | 1.3 | 2.5 | 3.8 | 5.0 | 6.3 | 7.5 |
| 10%SDS | 0.05 | 0.1 | 0.15 | 0.2 | 0.25 | 0.3 |
| 10%过硫酸铵 | 0.05 | 0.1 | 0.15 | 0.2 | 0.25 | 0.3 |
| TEMED | 0.002 | 0.004 | 0.006 | 0.008 | 0.01 | 0.012 |
| 成分 | 所需各成分的体积(毫升) | |||||
| 凝胶体积 | 5 | 10 | 15 | 20 | 25 | 30 |
| 蒸馏水 | 1.1 | 2.3 | 3.4 | 4.6 | 5.7 | 6.9 |
| 30%丙烯酰胺混合液 | 2.5 | 5.0 | 7.5 | 10.0 | 12.5 | 15.0 |
| 1.5mol/L Tris(pH8.8) | 1.3 | 2.5 | 3.8 | 5.0 | 6.3 | 7.5 |
| 10%SDS | 0.05 | 0.1 | 0.15 | 0.2 | 0.25 | 0.3 |
| 10%过硫酸铵 | 0.05 | 0.1 | 0.15 | 0.2 | 0.25 | 0.3 |
| TEMED | 0.002 | 0.004 | 0.006 | 0.008 | 0.001 | 0.012 |
3. 按照如下表格配制SDS-PAGE的浓缩胶(也称上层胶、积层胶或堆积胶)
配制不同体积的浓缩胶
| 成分 | 所需各成分的体积(毫升) | |||||
| 凝胶体积 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 8 |
| 蒸馏水凝胶体积 | 1.4 | 2.1 | 2.7 | 3.4 | 4.1 | 5.5 |
| 30%丙烯酰胺混合液 | 0.33 | 0.5 | 0.67 | 0.83 | 1.0 | 1.3 |
| 1.0mol/L Tris(pH6.8) | 0.25 | 0.38 | 0.5 | 0.63 | 0.75 | 1.0 |
| 10%SDS | 0.02 | 0.03 | 0.04 | 0.05 | 0.06 | 0.08 |
| 10%过硫酸铵 | 0.02 | 0.03 | 0.04 | 0.05 | 0.06 | 0.08 |
| TEMED | 0.002 | 0.003 | 0.004 | 0.005 | 0.006 | 0.008 |
注意事项: 10%过硫酸铵的水溶液不稳定,每次取用后应立即放回冰箱,
尽量减少室温存放时间,以防失效。如发现凝胶聚合不好,应考虑丢弃使用过的10%过硫酸铵,
更换新配制的10%过硫酸铵。
另外PAGE凝聚的速度和温度及催化剂的用量关系密切,在其它条件不变的情况下,
可通过改变TEMED的用量,控制PAGE凝胶的聚合速度,凝胶聚合过快不利于操作。
操作中,特别是液体的混匀应尽量避免气泡的产生。
未聚合的丙烯酰胺有毒,为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
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