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技术文章

高灵敏度快速检测红细胞中亚铁血红素含量的方法

点击次数:4958 发布时间:2016/11/3 10:52:25

高灵敏度快速检测红细胞中亚铁血红素含量的方法

在实验室条件下快速准确的检测出亚铁血红素的含量是十分重要的,其重要程度正如胞内血红蛋白在新陈代谢中所扮演的重要角色。Jason R. Marcero 等研究者将传统的检测方法(吡啶血色原检测法,荧光亚铁血红素检测法)与采用CLARiTY分光光度计实施的以光谱技术为基础的检测方法相比较。用以上三种检测方法检测血红蛋白标准液,老鼠全血,小鼠红白血病细胞(MEL)以及小鼠K562细胞,检测结果显示所有样本均富含与血红蛋白相结合的亚铁血红素。然而在亚铁血红素的检测过程中,吡啶血色原检测方法显示出最大的线性范围,三种检测方法的灵敏度和检测量(~1uM)均相似。荧光检测法在微量样品的检测方面表现出其独特性。将CLARiTY系统与吡啶血色原以及细胞计数相结合,使得0.46 uM-1 cm-1的血液、MEL细胞、K562细胞中的血红蛋白的消光系数能够被测定。这一测量数值可用于测定EML细胞血红蛋白随诱导素的添加量的变化情况,从而反映出诱导素对亚铁血红素生物合成的影响。

原文:

Jason R. Marcero, Robert B. Piel III, Joseph S. Burch, and Harry A. Dailey. Rapid and sensitive quantitation of heme in hemoglobinized cells. BioTechniques 61:83-91 (August 2016).

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