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鸡小肠黏膜上皮细胞
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品牌名称:$brandModel.Title型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/10/9 10:32:19
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详细内容
鸡小肠黏膜上皮细胞
产品简介:
产品名称 : 鸡小肠黏膜上皮细胞
产品品牌 : 生物
组织来源 : 小肠组织
产品规格 : 5×105cells/T 25细胞培养瓶
细胞简介:
鸡小肠黏膜上皮细胞分离自小肠组织;小肠位于腹中,上端接幽门与胃相通,下端通过阑门与大肠相连,是食物消化吸收的主要场所。小肠盘曲于腹腔内,上连胃幽门,下接盲肠,分为十二指肠、空肠和回肠三部分。
小肠内消化是至关重要的,因为食物经过小肠内胰液、胆汁和小肠液的化学性消化及小肠运动的机械性消化后,基本上完成了消化过程,同时营养物质被小肠黏膜吸收了。小肠管壁由黏膜、黏膜下层、肌层和浆膜构成。
其结构特点是管壁有环形皱襞,黏膜有许多绒毛,绒毛根部的上皮下陷至固有层,形成管状的肠腺,其开口位于绒毛根部之间。绒毛和肠腺与小肠的消化和吸收功能关系密切;构成肠腺的细胞有柱状细胞、杯状细胞、潘氏细胞和未分化细胞。
柱状细胞和内分泌细胞与绒毛上皮相似,接近绒毛的柱状细胞与吸收细胞相似,绒毛深部的柱状细胞微绒毛少而短,不形成纹状缘。小肠有三种功能即消化、吸收和分泌及运动功能,其中以吸收和分泌功能为主。平滑肌细胞的收缩是负责肠蠕动的动力,促使食物向下运动。肠黏膜上皮细胞是机体内外环境的重要屏障,持续暴露于大量抗原中,也是机体面对病原微生物的第一道防线。
因此,肠黏膜上皮细胞除有吸收、分泌和转运等重要生理功能之外,在黏膜先天性和获得性免疫防御机制中也起着重要作用。肠黏膜上皮细胞作为首先接触抗原的细胞,在黏膜免疫反应的起始阶段发挥关键作用,它决定黏膜免疫反应的发生、性质和强度。
方法简介:
生物实验室分离的鸡小肠黏膜上皮细胞采用中性蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×105cells/瓶 。
质量检测:
生物实验室分离的鸡小肠黏膜上皮细胞经经C ytokeratin-18免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件 : 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm 2)
培 养 基 : 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptom ycin等
换液频率 : 每2-3天换液一次
生长特性 : 贴壁
细胞形态 : 上皮细胞样
传代特性 : 可传1代
传代比例 : 1:2
消 化 液 : 0. 25% 胰蛋白酶
培养条件 : 气相 : 空气,95% 。C O2,5%鸡小肠黏膜上皮细胞体外培养周期有限。建议使用生物配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
细胞培养状态:
发货时发送细胞电子版照片
使用方法:
鸡小肠黏膜上皮细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈上皮细胞样,在生物技术部标准操作流程下,细胞可传1代;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作:
1 .取出T 25细胞培养瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2.贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次。
2)添加0.25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5xy完全培养基终止消化。
3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5m L,置于37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。
4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3.细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1m g/m l),明胶(0.1% ),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
注意事项:
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和生物技术部沟通。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
| 原代细胞培养问 题 | |
| 组织块直接培养法 | 1. 取材,用 Hank's液洗涤三次,并剔除脂肪,结缔组织,血液等杂物。 |
| 2. 用手术剪将组织剪切成 1mm3左右的小块,再用Hank's液洗三次。 | |
| 3. 将组织块转移至培养瓶,并贴附于瓶底面。 | |
| 4. 轻轻将培养瓶翻转,瓶底朝上,向瓶内注入适量的培养液,将培养瓶放置在 37℃恒温箱内培养。 | |
| 5. 放置待组织小块贴附后,将培养瓶慢慢翻转平放,使组织浸入培养液中 37℃继续培养。 | |
| 消化培养法 | 1. 取材,用 Hank's液洗涤三次,并剔除脂肪,结缔组织,血液等杂物。 |
| 2. 用手术剪将组织剪切成 1mm3左右的小块,再用Hank's液洗三次。 | |
| 3. 视组织块量加入酶液, 37℃中消化20—40分钟,每隔5分钟振荡一次,或用吸管吹打一次,使细胞分离。 | |
| 4. 加入 3—5xy培养液以终止酶消化作用(或加入相关酶抑制剂)。 | |
| 5. 静置 5—10分钟,使未分散的组织块下沉,取悬液加入到离心管中。 | |
| 6. 1000rpm,离心10分钟,弃上清液。 | |
| 7. 加入 Hank's液5xy,冲散细胞,再离心一次,弃上清液。 | |
| 8. 加入培养液 1—2xy(视细胞量),血球计数板计数。 | |
| 9. 将细胞转移到培养瓶中, 37℃下培养。 | |
| 器官培养法 | 1. 将不锈网做成支架形状,调整其高度至培养皿的 1/2深度平面,在其表面放置0.5μm孔径滤膜。 |
| 2. 将培养液加入培养皿中,使液面刚刚接触到滤膜,但不要使其浮起。 | |
| 3. 将要培养器官组织放在滤膜上,一般厚度不要超过 200μm,水平面积不超过10mm2。 | |
| 4. 将上述准备好的培养物放入 CO2培养箱,并加注氧气调整氧分压,建议到90%。 | |
| 5. 培养过程中要注意观察培养液平面,尽可能保持在与滤膜一致的水平上。 | |
| 6. 上述可进行器官培养 1-3周,每2-3天换液一次,并根据情况做进一步实验和检测。 | |
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