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技术文章
富衡生物｜细胞增殖检测常用手段，科研小白也能快速上手
点击次数：1067 发布时间：2026/3/12 10:14:59
养细胞的科研人常问：细胞到底长没长、长得快不快？细胞增殖检测是实验核心，选对方法能让效率翻倍，避免无效劳动。 以下按“易操作→高”，盘点实验室最常用的检测手段，新手老手都适用👇
类：入门级｜直接计数法（简单直观）
（自动化细胞计数仪）
直接统计细胞数量，判断增殖大致趋势，适合新手入门。核心是通过工具计数，细胞数量越多，增殖能力越强。
血球计数板：成本低、操作简，有显微镜即可，缺点是手工计数误差大，需台盼蓝辅助区分死活细胞。
自动化细胞计数仪：效率高、数据准，可自动区分死活细胞，缺点是购置和使用成本高。
适用：预实验、样本量少或预算有限的基础实验。
第二类：主流级｜代谢活性检测法（实验室）
（CCK-8法）
通过检测细胞代谢活力间接判断增殖，细胞越旺盛，线粒体酶活性或ATP含量越高，应用最广泛。
1. MTT法（经典高性价比）
黄色MTT被活细胞线粒体脱氢酶还原为紫色甲臜，酶标仪检测吸光度，吸光度越高增殖越强。
优点：试剂便宜、操作简；缺点：需DMSO溶解结晶，试剂对细胞有损伤，正逐渐被替代。
2. CCK-8法（MTT升级版，）
用WST-8替代MTT，产物水溶性，无需溶解步骤，三步即可完成，兼容96孔板，适合高通量检测。
优点：操作简便、毒性小、灵敏度高、重复性好；缺点：试剂成本略高于MTT。
小技巧：药物筛选设3复孔，边缘孔填PBS防蒸发，孵育1-4小时检测450nm OD值即可。
3. ATP含量检测法（高灵敏度）
ATP浓度与活细胞数量正相关，荧光素酶催化反应产生光信号，发光越强增殖越旺盛。
优点：灵敏度极高，适合微量样本和高通量筛选；缺点：成本最高，可能因药物影响线粒体出现假阳性，需验证。
第三类：级｜直接检测DNA合成（最可靠）
（EdU-555细胞增殖检测试剂盒(适用于FACS、FM)）
直接检测DNA复制，识别增殖细胞，适合细胞周期、增殖机制等精细实验，结果最有说服力。
1. ³H-胸苷掺入法（经典渐淘汰）
放射性胸苷掺入DNA，检测放射性强度反映增殖。优点是可靠，缺点是有放射性、操作复杂、危害环境，已逐渐淘汰。
2. BrdU/EdU法（非放射性主流）
人工合成胸腺嘧啶类似物，DNA复制时掺入链中，是非放射性替代方案，也是目前最常用的DNA合成检测方法。
原创作者：上海富衡生物科技有限公司
