企业档案
会员类型：旗舰版
已获得阿仪网信誉 等级评定
(0 -40)基础信誉积累，可浏览访问
(41-90)良好信誉积累，可接洽商谈
(91+ )优质信誉积累，可持续信赖
阿仪网旗舰版会员：3年
工商认证 【已认证】
最后认证时间：
注册号： 【已认证】
法人代表： 【已认证】
参观次数：742505
技术文章
上海富衡 | 人乳腺癌细胞MDA-MB-231
点击次数：2314 发布时间：2025/5/13 9:14:45
MDA-MB-231是乳腺癌研究中广泛使用的高侵袭性三阴性乳腺癌（TNBC）细胞系，因其缺乏雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）和人表皮生长因子受体2（HER2）表达，成为研究转移机制、药物耐药性和肿瘤微环境的经典模型。以下是对该细胞系的详细分点阐述：
1. 细胞来源与生物学特性
来源：分离自一名51岁女性乳腺癌患者的胸腔积液，属于转移性腺癌细胞。
分子分型：三阴性（TNBC）：ER⁻、PR⁻、HER2⁻，对内分泌治疗和HER2靶向治疗不敏感。高侵袭性：高表达基质金属蛋白酶（MMP-2/9）、波形蛋白（Vimentin）和N-钙黏蛋白（N-cadherin），具有上皮-间充质转化（EMT）特性。
基因突变：常见p53突变（TP53基因）和KRAS激活，与肿瘤进展和耐药性相关。
2. 主要应用领域
转移机制研究：体外迁移/侵袭实验：Transwell小室（Matrigel涂层）模拟细胞侵袭能力。体内转移模型：通过尾静脉注射构建肺转移小鼠模型。
药物开发与耐药性：化疗耐药：对紫杉醇、阿霉素等化疗药物敏感性低，常用于研究多药耐药蛋白（如P-gp）的作用。靶向治疗：测试PARP抑制剂（如奥拉帕尼）和免疫检查点抑制剂（如PD-1/PD-L1抑制剂）的疗效。
肿瘤微环境模拟：共培养系统：与肿瘤相关成纤维细胞（CAFs）或免疫细胞（如巨噬细胞）共培养，研究细胞间相互作用。缺氧模型：通过低氧培养（1% O₂）模拟肿瘤缺氧微环境，研究HIF-1α信号通路。
3. 培养条件与操作要点
培养基：DMEM（高糖） + 10%胎牛血清（FBS） + 1%青霉素/链霉素。
传代方法：消化：0.25%胰蛋白酶-EDTA消化3-5分钟（细胞易成簇，需轻柔吹散）。传代比例：1:4至1:6，密度过低可能导致生长停滞。
冻存与复苏：冻存液：90% FBS + 10% DMSO，程序降温后液氮保存。复苏后：离心去除DMSO，重悬于预温培养基中。
4. 细胞特性验证
标志物检测：三阴性验证：免疫荧光/WB检测ER、PR、HER2阴性表达。EMT标志物：E-cadherin⁻、Vimentin⁺、N-cadherin⁺。
功能实验：划痕实验：评估细胞迁移能力（划痕闭合率）。软琼脂克隆形成：检测锚定非依赖性生长能力（恶性转化标志）。
5. 注意事项与常见问题
支原体污染：定期检测（如PCR或Hoechst染色），若污染需丢弃细胞。
细胞聚团：MDA-MB-231易成团，可通过低浓度胰蛋白酶（0.05%）延长消化时间至10分钟。
基因表达稳定性：长期传代可能导致表型漂移，建议使用低代次（<30代）细胞。
实验重复性：侵袭实验需控制Matrigel批次和铺胶厚度的一致性。
6. 与其他乳腺癌细胞系的对比
MCF-7：ER⁺/PR⁺/HER2⁻，激素依赖性，低侵袭性，适合研究内分泌治疗。
SK-BR-3：HER2⁺，适合靶向HER2的药物研究。
BT-474：ER⁺/PR⁺/HER2⁺，三阳性，用于联合治疗研究。
7. 研究案例参考
转移机制：过表达miR-200c抑制EMT，降低细胞侵袭能力（Transwell实验验证）。
耐药性研究：沉默P-gp基因（ABCB1）可逆转紫杉醇耐药（MTT/流式细胞术检测凋亡）。
免疫治疗：PD-L1高表达，抑制PD-1/PD-L1可增强T细胞杀伤活性（共培养杀伤实验）。
总结：MDA-MB-231是研究三阴性乳腺癌转移和耐药的理想模型，但其高度异质性和侵袭性需在实验设计中严格控制变量，结合体内外模型验证结果。
原创作者：上海富衡生物科技有限公司
