B16-F10-OVA小鼠黑色素瘤细胞荧光素酶标记-OVA鸡基因修饰（B16-F10-OVA鸡基因修饰）（STR鉴定）

细胞鉴定：种属鉴定已通过

细胞来源 ：国家资源库

细胞背景：纺锤形和上皮样细胞的混合物

https://www.atcc.org/products/crl-6475

细胞特性

1） 来源：小鼠黑色素瘤

2） 形态：上皮细胞样 贴壁生长

3） 含量：>1x106 细胞数

4） 规格：T25 瓶或者 1mL 冻存管包装

5） 用途：仅供科研使用

培养条件

1） 准备 DMEM(含 NaHCO3 1.5g / L）

添加 NaHCO3 1.5g/L）89 %，优质胎牛血清 10 %，P/S 双抗 1%2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37 摄氏度，培养箱湿度

为 70%-80%。

注意事项

该细胞在 DMEM(含 1.5g/LNaHCO3)培养基中生长良好，大部分品牌的 DMEM 含有较高

浓度的 NaHCO3（3.7g/L），若使用 DMEM（3.7g/L NaHCO3）培养基培养细胞时需要提

高 CO2 浓度（7%-10%）。

对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加入 0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA 于培养瓶中（T25 瓶 1-2mL，

T75 瓶 2-3mL），

置于 37℃培养箱中消化 1-2 分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显

微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养

瓶后加入 3-4ml 含 10%FBS 的培养基来终止消化。

3.轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 3-5min，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液

后吹匀。将细胞悬液按 1：2 的比例分到新 T25 瓶中，添加 6-8ml 按照说明书要求配置

的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按 1:2~1:5 的比例进行。

3）细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前 3 代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

运输形式

低温：（1）1mL 冻存管包装干冰运输，收到后-80 度冰箱保存过夜后转入液氮或直接

复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立

即与我们联系。

常温: （2） T25 瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

生物安全

1. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注

意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

2. 建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意：冻存管浸

没在液氮中会泄漏，并会慢慢充满液氮。解冻时，液氮转化成气相可能导致容器爆炸或

用危险力吹掉其盖子，从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。