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更新时间:2026/9/7 20:59:08关注度:8
关键词标签:细胞系,RAMOS-FLUC-puro人B淋巴细胞瘤细胞
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RAMOS-FLUC-puro人B淋巴细胞瘤细胞
细胞介绍
种属: 人源
组织来源: 淋巴细胞
疾病: 淋巴瘤
年龄: 3岁
细胞类型: 淋巴母细胞
生长特性: 悬浮生长
含量:>1x106 细胞数
规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
用途:仅供科研使用。
Luciferase RAMOS细胞稳定表达萤火虫荧光素酶。该细胞株性状稳定,培养时不需要添加抗生素维持。可用作萤火虫荧光素酶活性检测中的阳性对照,也可用于活体动物成像实验。
该细胞通过慢病毒转染的方式携带Luc基因。
RAMOS细胞来源于一位3岁的白人Burkitt's淋巴瘤患者。RAMOS细胞EBV阴性,表达IL-4受体和低亲和性IgE受体(CD23);每个RAMOS细胞表面大约有1500个IL-4的结合位点。RAMOS细胞可分泌IgM,表达膜型和分泌型的免疫球蛋白。
运输和保存
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
细胞接收后的处理
1)收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后次传代建议T25培养瓶1:2传代 。
一.培养基及培养冻存条件准备:
准备RPMI-1640+10%FBS+P/S1%。
气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
注:该细胞puro药筛浓度为0.5ug/ml,培养过程中建议使用0.2ug/ml浓度puro维持。
puro药筛浓度:RAMOS-FLUC细胞puro药筛浓度为0.5ug/ml,培养过程中建议使用0.2ug/ml浓度puro维持
冻存条件:无血清冻存液。
二. 细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
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