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更新时间:2026/9/7 20:59:08关注度:20
关键词标签:血液制品,豚鼠红细胞
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豚鼠红细胞
豚鼠红细胞不同浓度的配制方法、实验用途、备注及注意事项
一、基础预处理(全浓度通用前置操作)
1. 采血与抗凝
选用健康成年SPF级豚鼠,采用心脏采血或腹腔大血管采血方式;抗凝体系优先选用阿氏液(Alsever液),采血与阿氏液按照1:1的体积比,轻柔颠倒混匀,以防止凝血与机械溶血。
2. 标准化洗涤步骤
1. 将抗凝全血分装于离心管,以1500 - 2000r/min的转速离心5 - 10min。
2. 弃去上层血浆及白膜层(包含白细胞、血小板),仅保留底层红色压积红细胞。
3. 加入3 - 5倍体积的无菌PBS(pH7.2 - 7.4)或无菌生理盐水,轻柔重悬。
4. 重复洗涤3 - 4次,直至上清液清澈无淡红色(即无游离血红蛋白)。
5. 末次以2000r/min的转速离心10min,吸尽上清,获得纯净豚鼠压积红细胞,于4℃暂存备用。
核心要点:洗涤不充分会残留补体、异种蛋白、天然抗体,进而引发非特异性溶血、凝集,干扰实验结果。
二、各浓度豚鼠红细胞:配制方法 + 用途 + 备注说明
以纯化压积红细胞为基准进行配制,稀释溶剂:常规实验采用无菌PBS/生理盐水;长期保存则使用阿氏液。
1. 0.5%豚鼠红细胞悬液
配制:将0.5 mL压积红细胞与99.5 mL稀释液轻柔颠倒混匀。
实验用途:适用于微量血凝试验、间接血凝试验、血清学微量凝集筛查、免疫学弱反应检测。
备注:该浓度极低,细胞沉降缓慢、反应均匀;需现配现用,4℃保存不超过3天;不可剧烈震荡。
2. 1%豚鼠红细胞悬液(免疫学*常用)
配制:将1 mL压积红细胞与99 mL稀释液混匀。
实验用途:用于补体结合试验、被动血凝实验、抗体效价检测、微生物血清学鉴定、体外免疫凝集实验。
备注:通用性*强,反应灵敏度与稳定性达到均衡;4℃密封保存5 - 7天,若上清发红需立即丢弃。
3. 2%豚鼠红细胞悬液(经典实验款)
配制:将2 mL压积红细胞与98 mL稀释液轻柔混匀。
实验用途:可用于溶血试验、巨噬细胞吞噬功能测定、免疫学溶血空斑试验、药物溶血毒性筛选、补体介导溶血实验。
备注:细胞浓度适中,溶血现象观察清晰;建议3天内使用,新鲜配制时实验误差*小。
4. 5%豚鼠红细胞悬液
配制:将5 mL压积红细胞与95 mL稀释液混匀。
实验用途:用于经典CH50总补体活性测定、补体组分功能分析、体外溶血动力学实验、理化因素溶血研究。
- 备注:细胞密度高,沉降较快;4℃可短期保存15天,需每日定时轻柔颠倒,防止细胞结块。
5. 10%豚鼠红细胞储备悬液
配制:将10 mL压积红细胞与90 mL无菌阿氏液配制而成。
实验用途:作为实验室储备母液,用于逐级稀释配制低浓度红细胞悬液、批量实验批量制备。
备注:仅可用阿氏液保存,禁止用生理盐水/PBS长期存放;2 - 8℃可保存30天,严禁冷冻。
三、通用核心注意事项
1. 动物与样本要求
1. 优先选用健康无感染、未免疫的成年豚鼠,避免体内天然异嗜性抗体、补体异常对实验结果产生影响。
2. 可采用多只豚鼠混合采血的方式,以消除个体差异,提高实验重复性。
3. 严禁使用溶血、脂血、污染的不合格血液样本。
2. 操作与浓度控制
1. 全程需轻柔操作,禁止剧烈吹打、高速震荡,因为豚鼠红细胞脆性高于鸡红细胞,极易发生机械破裂溶血。
2. 需计量体积,浓度偏高会导致凝集偏弱、溶血结果偏低;浓度偏低会造成假阳性、结果偏差。
3. 所有容器、稀释液需确保无菌无热源,防止细菌污染诱发自发性溶血。
3. 保存条件禁忌
1. 所有浓度红细胞悬液禁止冷冻,低温冻融会直接造成全1. 部分细胞发生破裂并丧失功能;
2. 低浓度(0.5%、1%、2%)溶液稳定性欠佳,需进行新鲜配制;高浓度储备液应采取避光、密封并冷藏保存的方式;
3. 保存过程中若出现上清液变红、液体浑浊以及絮状沉淀等现象,则表明发生溶血或污染,该溶液必须予以废弃。
4. 实验环境与体系的适配性
1. 血清学凝集实验:需将室温控制在20~25℃,温度过高会加速细胞老化,过低则会减缓凝集反应;
2. 溶血实验需对pH值与离子强度进行严格控制,PBS缓冲液应定期配制,以防止缓冲体系失效;
3. 实验必须设置空白对照组、阴性/阳性对照,以排除非特异性反应的干扰。
5. 物种间的特殊差异
豚鼠红细胞膜的脆性较大,且对补体的敏感度极高,相较于鸡红细胞:
洗涤次数不宜过多,离心转速不可过高;在进行补体相关实验时,更需对实验时间与温度进行严格控制。
四、快速总结对照表
红细胞浓度 核心应用场景 保存周期 关键备注
0.5% 微量凝集、弱抗体检测 ≤3d 现配现用,防止溶血
1% 血清学检测、补体结合 5~7d 实验室常规
2% 吞噬实验、药物溶血筛选 ≤3d 必须新鲜配制
5% CH50补体测定、溶血研究 15d 定期摇匀以防止沉降
10% 母液储备、批量稀释 30d 采用阿氏液冷藏保存
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货号
产品名称
规格
单位
保质期
动物红细胞
鸡
B0001-4
4%鸡红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0001-6
6%鸡红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0001-20
20%鸡红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0002
4%醛化鸡红细胞
100ml/瓶
瓶
三个月
鸽子
B0003-2
2%鸽子红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0003-4
4%鸽子红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0004
2%醛化鸽子红细胞
100ml/瓶
瓶
三个月
兔
B0005-4
4%兔红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0005-6
6%兔红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0005-20
20%兔红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0006
4%醛化兔红细胞
100ml/瓶
瓶
三个月
猫
B0007-4
4%猫红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0007-6
6%猫红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0008
4%醛化猫红细胞
100ml/瓶
瓶
三个月
绵羊
B0009-4
4%绵羊红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0009-6
6%绵羊红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0009-10
10%绵羊红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0009-20
20%绵羊红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0010
4%醛化绵羊红细胞
100ml/瓶
瓶
三个月
牛
B0014-4
4%牛红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0014-6
6%牛红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0015
4%醛化牛红细胞
100ml/瓶
瓶
三个月
猪
B0018-4
4%猪红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0018-6
6%猪红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0019
4%醛化猪红细胞
100ml/瓶
瓶
三个月
B0020-4
4%猪白细胞
10ml/瓶
瓶
一个月
B0020-8
8%猪白细胞
10ml/瓶
瓶
一个月
乌鸡
B0021-4
4%乌鸡红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0021-6
6%乌鸡红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0022
4%醛化乌鸡红细胞
100ml/瓶
瓶
三个月
豚鼠
B0023-1
1%豚鼠红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0023-2
2%豚鼠红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0023-4
4%豚鼠红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0023-6
6%豚鼠红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0024
1%醛化豚鼠红细胞
100ml/瓶
瓶
三个月
鸭
B0028-2
2%鸭红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0028-4
4%鸭红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0028-6
6%鸭红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0029
2%醛化鸭红细胞
100ml/瓶
瓶
三个月
鹅
B0032-2
2%鹅红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0032-4
4%鹅红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0032-6
6%鹅红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0033
2%醛化鹅红细胞
100ml/瓶
瓶
三个月
小鼠
B0036-1
1%小鼠红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0036-2
2%小鼠红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0036-4
4%小鼠红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0036-6
6%小鼠红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0037
1%醛化小鼠红细胞
100ml/瓶
瓶
三个月
大鼠
B0042-1
1%大鼠红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0042-2
2%大鼠红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0042-4
4%大鼠红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0042-6
6%大鼠红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0043
1%醛化大鼠红细胞
100ml/瓶
瓶
三个月
鲤鱼
B0048-1
1%鲤鱼红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0048-2
2%鲤鱼红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0049
1%醛化鲤鱼红细胞
100ml/瓶
瓶
三个月
A/B/O型红细胞
B0050
2%人AB型血红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0051-2
2%O型红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0051-4
4%O型红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0051-5
5%O型红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0053
2%醛化O型红细胞
100ml/瓶
瓶
三个月
B0148-2
2%A型红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0148-5
5%A型红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0149-2
2%B型红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0149-5
5%B型红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
火鸡红细胞
B0054-1
1%火鸡红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0054-2
4%火鸡红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0055
1%醛化火鸡红细胞
100ml/瓶
瓶
三个月
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