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更新时间:2026/9/7 20:59:08关注度:19
关键词标签:血液制品,4%火鸡红细胞
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4%火鸡红细胞
鸡红细胞介绍
一、常用浓度与制备方法(0.5%、1%、2%、5%、10%)
通用前处理(所有浓度共用)
1. 采血:选取2 - 6月龄的无特定病原体(SPF)鸡或未免疫的健康公鸡,通过翅静脉或心脏进行采血;采用阿氏液(Alsever)进行抗凝处理,血液与阿氏液的比例为1:1。
2. 洗涤:将抗凝血进行离心操作(1500 - 2000 r/min,5 - 10 min),弃去上清液与白细胞层,加入3 - 5倍体积的无菌磷酸盐缓冲液(PBS,pH 7.0 - 7.2),进行重悬并再次离心;重复此操作3 - 4次,直至上清液清亮且无溶血现象。
3. 压积红细胞:进行末次离心(2000 r/min,10 min),弃尽上清液,获得压积红细胞(PCV),置于4℃环境备用。
各浓度配制(以压积红细胞为基准)
- 0.5%悬液:取0.5 mL压积红细胞与99.5 mL PBS/生理盐水混合,轻柔摇晃使其均匀。用途:用于微量血凝(HA)/血凝抑制(HI)试验(新城疫、禽流感抗体检测)。备注:该浓度*为常用,需现配现用(7天内),并在4℃环境保存。
- 1%悬液:取1 mL压积红细胞与99 mL PBS/生理盐水混合,轻柔摇晃使其均匀。用途:用于HA/HI试验、补体结合试验、E花环试验。备注:该浓度较为稳定,在4℃环境可保存7天,若出现溶血现象则需弃用。
- 2%悬液:取2 mL压积红细胞与98 mL PBS/生理盐水混合,轻柔摇晃使其均匀。用途:用于巨噬细胞吞噬实验、溶血空斑实验(PF)。备注:该浓度较高,宜新鲜配制(3天内)。
- 5%悬液:取5 mL压积红细胞与95 mL PBS/生理盐水混合,轻柔摇晃使其均匀。用途:用于总补体溶血活性(CH50)检测、补体功能评价。备注:在4℃环境保存不超过1个月,需每日颠倒以防止沉降。
- 10%悬液(储备液):取10 mL压积红细胞与90 mL阿氏液混合,轻柔摇晃使其均匀。用途:用于长期保存以及稀释配制低浓度悬液。备注:在2 - 8℃环境可保存1个月,严禁冷冻;需每日轻摇以防止沉降。
二、鸡红细胞不同浓度实验用途
0.5%鸡红细胞:用于HA/HI试验(病毒血凝效价、血清抗体效价)。
1%鸡红细胞:用于HA/HI、补体结合、E花环、血型鉴定。
2%鸡红细胞:用于巨噬细胞吞噬、溶血空斑(B细胞功能)。
5%鸡红细胞:用于CH50、补体活性、溶血动力学研究。
10%鸡红细胞:作为储备液,用于批量低浓度配制、长期保藏。
三、鸡红细胞关键注意事项(全浓度通用 + 分浓度要点)
1. 采血与来源
选用SPF鸡或无新城疫/禽流感抗体的健康鸡,以避免天然抗体的干扰。
采用多只鸡(2 - 4只)混合采血的方式,以降低个体差异。
2. 洗涤质控
- 务必进行3 - 4次洗涤操作,以去除血浆蛋白、抗体、抗凝剂,防止非特异性凝集/溶血现象的发生。
末次离心需在2000 r/min条件下进行10 min,弃尽上清液,避免残留杂质。
3. 浓度
浓度偏差会直接影响实验结果:浓度偏高会导致血凝价偏低;浓度偏低会导致血凝价偏高。
采用差值法进行校准:压积红细胞体积与稀释液体积之和等于目标总体积,需精确计算。
4. 保存与稳定性
0.5%/1%鸡红细胞:在4℃环境保存,需在7天内用完,若出现溶血(上清变红)现象则需弃用。
2%鸡红细胞:在4℃环境保存,需在3天内用完,优先使用新鲜配制的悬液。
5%鸡红细胞:在4℃环境保存不超过1个月,需每日轻摇以防止沉降。
10%鸡红细胞(阿氏液):在2 - 8℃环境保存1个月,严禁冷冻(冷冻会导致溶血报废)。
5. 操作禁忌
禁止进行剧烈吹打/震荡操作,以免导致红细胞破裂溶血,使实验失效。
需进行无菌操作:全程保持无菌环境,防止细菌污染导致溶血/变质。
温度控制:HA/HI试验需在室温20 - 25℃条件下进行,静置30 - 40 min,温度波动会影响凝集效果。
6. 实验对照
必须设置空白对照(PBS)、阳性/阴性血清对照,以排除非特异性反应,确保实验结果的可靠性。
四、鸡红细胞常见问题与解决
-溶血:若因洗涤不充分、冻融、剧烈震荡导致溶血,需重新洗涤、在4℃环境保存、进行轻柔操作。
凝集不佳:若因浓度不准、红细胞老化、污染导致凝集不佳,需校准浓度、新鲜配制、进行无菌操作。
沉降过快:若因浓度过高、保存过久导致沉降过快,需降低浓度、每日摇匀、缩短保存期。
需要我把以上内容整理成一份可直接执行的SOP(含配方、操作步骤与质控节点)吗?
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货号
产品名称
规格
单位
保质期
动物红细胞
鸡
B0001-4
4%鸡红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0001-6
6%鸡红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0001-20
20%鸡红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0002
4%醛化鸡红细胞
100ml/瓶
瓶
三个月
鸽子
B0003-2
2%鸽子红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0003-4
4%鸽子红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0004
2%醛化鸽子红细胞
100ml/瓶
瓶
三个月
兔
B0005-4
4%兔红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0005-6
6%兔红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0005-20
20%兔红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0006
4%醛化兔红细胞
100ml/瓶
瓶
三个月
猫
B0007-4
4%猫红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0007-6
6%猫红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0008
4%醛化猫红细胞
100ml/瓶
瓶
三个月
绵羊
B0009-4
4%绵羊红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0009-6
6%绵羊红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0009-10
10%绵羊红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0009-20
20%绵羊红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0010
4%醛化绵羊红细胞
100ml/瓶
瓶
三个月
牛
B0014-4
4%牛红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0014-6
6%牛红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0015
4%醛化牛红细胞
100ml/瓶
瓶
三个月
猪
B0018-4
4%猪红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0018-6
6%猪红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0019
4%醛化猪红细胞
100ml/瓶
瓶
三个月
B0020-4
4%猪白细胞
10ml/瓶
瓶
一个月
B0020-8
8%猪白细胞
10ml/瓶
瓶
一个月
乌鸡
B0021-4
4%乌鸡红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0021-6
6%乌鸡红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0022
4%醛化乌鸡红细胞
100ml/瓶
瓶
三个月
豚鼠
B0023-1
1%豚鼠红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0023-2
2%豚鼠红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0023-4
4%豚鼠红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0023-6
6%豚鼠红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0024
1%醛化豚鼠红细胞
100ml/瓶
瓶
三个月
鸭
B0028-2
2%鸭红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0028-4
4%鸭红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0028-6
6%鸭红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0029
2%醛化鸭红细胞
100ml/瓶
瓶
三个月
鹅
B0032-2
2%鹅红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0032-4
4%鹅红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0032-6
6%鹅红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0033
2%醛化鹅红细胞
100ml/瓶
瓶
三个月
小鼠
B0036-1
1%小鼠红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0036-2
2%小鼠红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0036-4
4%小鼠红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0036-6
6%小鼠红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0037
1%醛化小鼠红细胞
100ml/瓶
瓶
三个月
大鼠
B0042-1
1%大鼠红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0042-2
2%大鼠红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0042-4
4%大鼠红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0042-6
6%大鼠红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0043
1%醛化大鼠红细胞
100ml/瓶
瓶
三个月
鲤鱼
B0048-1
1%鲤鱼红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0048-2
2%鲤鱼红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0049
1%醛化鲤鱼红细胞
100ml/瓶
瓶
三个月
A/B/O型红细胞
B0050
2%人AB型血红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0051-2
2%O型红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0051-4
4%O型红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0051-5
5%O型红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0053
2%醛化O型红细胞
100ml/瓶
瓶
三个月
B0148-2
2%A型红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0148-5
5%A型红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0149-2
2%B型红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0149-5
5%B型红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
火鸡红细胞
B0054-1
1%火鸡红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0054-2
4%火鸡红细胞
100ml/瓶
瓶
一个月
B0055
1%醛化火鸡红细胞
100ml/瓶
瓶
三个月
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