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更新时间:2026/9/7 20:58:56关注度:12
关键词标签:培养基,RPMI1640培养基(不含氨基酸)
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RPMI1640培养基(不含氨基酸)
RPMI-1640是Moore等人于1967年在美国纽约州法罗市的罗斯韦尔公园纪念研究所(Roswell Park Memorial Institute, RPMI)开发出来的,RPMI是该研究所开发的一类细胞培养基,1640是培养基代号。RPMI-1640是改进型的McCoy 's 5A培养基,使用碳酸氢盐缓冲系统,与大多数哺乳动物细胞培养基不同的是其典型的PH8的配方。RPMI-1640培养基*初是为淋巴细胞培养专门设计的,现在已广泛应用于各种正常细胞和癌细胞的培养,尤其是悬浮细胞的培养,是使用*为广泛的培养基之一。 本产品含有多类细胞培养所需的氨基酸、维生素、无机盐等多种成分,但不含蛋白质、脂类或任何生长因子,故此产品需搭配血清或无血清添加物使用。 不含氨基酸细胞培养基(Amino Acid-Free Medium)介绍 不含氨基酸细胞培养基是一种成分极其简化的细胞培养基,其核心特征是完全不含有任何氨基酸成分。它并非独立使用,而是作为一种“基础骨架”,根据实验需求,由研究者自主、、定量地补加所需的氨基酸或其他营养因子。 这种培养基在细胞生物学研究中具有不可替代的价值,尤其侧重于精确控制与代谢机制研究。 1. 核心成分与组成 不含氨基酸培养基的配方通常包含以下四大基础模块,但不含任何氨基酸: 无机盐:如NaCl、KCl、MgSO₄、CaCl₂等,维持渗透压和离子平衡。 能量与碳源:核心为D-葡萄糖(或其他可代谢糖),是细胞的主要能量来源。 维生素与辅因子:包括B族维生素(如维生素B12、叶酸等)、抗坏血酸等。 缓冲体系:通常包含HEPES(生物缓冲剂)和NaHCO₃(依赖CO₂的缓冲系统),用于维持培养基pH稳定(通常需5-10% CO₂环境)。 2. 关键特性与优势 100%实验可控性:这是其*大价值。培养基中没有任何内源氨基酸,所有加入的成分(如特定氨基酸、同位素标记氨基酸)均为人为可控,消除了背景干扰。 营养极简:去除了不必要的成分,使实验结果更纯粹、重复性更强。 定制化灵活:可根据实验目的(如代谢组学、蛋白表达),精确添加单一氨基酸、组合氨基酸或梯度浓度氨基酸,实现“按需定制”。 3. 主要应用场景 不含氨基酸培养基主要用于需要精确控制营养环境的研究,而非常规细胞传代。 氨基酸代谢研究:追踪特定氨基酸的摄取、合成与分解通路。 营养应激与饥饿模型:模拟氨基酸匮乏(如氨基酸饥饿处理),研究细胞自噬、凋亡及应激信号通路(如mTOR通路)。 同位素标记代谢流(Metabolic Flux):添加¹³C或¹⁵N标记的氨基酸,用于高精度的代谢组学分析,解析细胞代谢网络。 特殊细胞培养:例如神经元培养专用的Neurobasal系列培养基,其核心设计理念之一就是去除兴奋性氨基酸(如谷氨酸),防止神经细胞毒性。 重组蛋白表达:在CHO细胞表达抗体或蛋白时,用于严格控制代谢流,提高蛋白表达的稳定性和产量。 4. 搭配使用的黄金搭档:上海语纯生物胎牛血清(不含氨基酸)货号:B0492 不含氨基酸培养基必须与无氨基酸血清配合使用,否则培养基中的氨基酸将被血清中的成分污染,失去实验意义。 核心要求:通常使用上海语纯生物胎牛血清(不含氨基酸)货号:B0492 5. 实验操作与保存要求 由于成分简单、营养缺乏,不含氨基酸培养基对实验环境要求更高: 严格无菌:需0.22µm滤膜过滤除菌,操作需在超净台内严格进行。 低温避光:多数成分对光和温度敏感,需4℃避光保存,避免反复冻融。 pH控制:使用NaHCO₃缓冲体系时,需严格控制培养箱CO₂浓度,防止pH剧烈波动(pH 7.2⁻⁷.4为*佳)。 实验周期:仅适用于短期实验(通常<72小时),不适合细胞长期传代培养,否则细胞会因营养耗尽而死亡。 实验周期:仅适用于短期实验(通常<72小时),不适合细胞长期传代培养,否则细胞会因营养耗尽而死亡。
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