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技术文章

水迷宫实验(MWM)

点击次数:3597 发布时间:2022/8/2 13:36:34

原理

Morris 水迷宫实验,通过强迫受试动物游泳,学习找寻藏于水中平台的一种游泳实验。观察并记录受试动物逃避游泳进而寻找水下平台所用的时长、采用的策略及游泳轨迹,分析并判断受试动物的学习、记忆和空间认知等方面的能力。比较客观地反应受试动物空间记忆、工作记忆以及空间辨别能力的改变。

用途

Morris 水迷宫实验,主要用于测试实验动物对空间位置感和方向感(空间定位)的学习记忆能力;主要用于疾病相关模型评价以及药理毒理学分析的研究。比如阿尔茨海默病疾病模型评价、海马/外海马研究、新药开发/筛选/评价等。

Y 迷宫实验

优点:

Y 型迷宫实验实验要求较低,实验操作相对简便,设备相对便宜占地面积小,而且数据处理相对简便。

不足:

1)实验过程存在较大的主观误差;

2)实验耗时长;

3)实验过程中,需要电击受试动物,容易造成动物应激,实验准确度较低。

八臂辐射迷宫

优点:

重复测量的稳定性较好。

不足:

对于有些药物(苯丙胺),影响下丘脑功能或造成食欲缺乏,影响迷宫中所采用的食欲动机,该类动物不能采用此实验方法。

材料与仪器

Morris 实验系统由水迷宫装置、水迷宫图像自动采集和软件分析系统组成。

步骤

1. 获得性训练( 5 d):

1)将圆形器皿均分为四个区间,其任意一个区间放置平台,且平台低于水面 1 cm,另外三个象限作为小鼠/大鼠的训练定位点。将小鼠依分别从三个象限中点背对圆盘圆心的方式放入水中,使其能自由探索至其寻找平台,记录其移动轨迹和移动时间,长寻找时间设定为 90 ,若超过 90 未寻到平台,则引导小鼠/大鼠到平台并且让小鼠停留 10 ,记录小鼠/大鼠的逃避潜伏期为 90 ;

2)每日在固定时间段训练 4 次,两次时间间隔 15-20 min。每日以小鼠/大鼠四次训练潜伏期的平均值做为小鼠/大鼠当日的学习成绩;

2.探查训练( 1 d):

3)第 6 天,撤除站台,进行 60s 的探查实验。随机选择同一入水点将小鼠/大鼠轻柔置于水中,记录小鼠/大鼠在 60s 内的游泳路径以及其在目标象限的停留时间和穿越目标象限的次数,观察小鼠/大鼠的空间定位能力、空间探索过程中的变化规律;

3.对位训练( 4 d):

4)实验进行至第 7 天,开始为期 4 天的对位训练。先,将平台置于原平台对侧象限,后续实验同获得性训练,每天训练 4 次。记录每次小鼠/大鼠找到平台的时间、游泳距离及游泳速度;

4. 对位探查训练( 1 d):

5)对位训练结束 24 h 后,进行对位探查训练,方法同对位训练。继而记录小鼠/大鼠 60s 内在目标象限(对位训练时平台所在象限)所用时长及进入该区次数。

注意事项

1. 实验时,环境安静,隔音,避免实验人员交谈及走动;

2. 开展实验后,尽量选择同一时间段进行实验;

3. 尽量提将受试动物置于水迷宫房间适应环境;

4. 受试动物置于水中时,动作轻柔,不要将动物头部朝下,避免不必要的应激刺激;

5. 实验结束后将受试动物擦干后放置笼内,避免受试动物生病;

6. 固定实验操作人员,且在正式实验固定操作人员每天对实验动物抚摸 1~2 min,连续 5 天以上,使受试动物熟悉气味,避免应激;

7. 若实验时用牛奶或奶粉搅浑泳池的水时,需要及时更换水以免水腐败变质。

常见问题

1. 受试动物在水中漂浮不动:

可能是水温度过高,大鼠温度范围一般为 25 ± 1℃,小鼠可能低些在 18~22℃。

2. 受试动物游几次潜伏期突然增大或出现抽筋、腹泻:

可能是水温度过低,受试体温下很快,游泳不能坚持。

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