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人 5α还原酶(5AR) 酶联免疫吸附测定试剂盒技术资料与说明书
点击次数:1938 发布时间:2025/8/21 15:51:14
人 5α还原酶(5AR) 酶联免疫吸附测定试剂盒
http://www.app17.com/c163958/products/d14465394.html
实验所需自备试验器材:
1. 酶标仪(450nm)
2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、
200-1000uL
3. 37℃恒温箱
4. 蒸馏水或去离子水
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样本处理及要求:
1. 血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置 2 小时
或 4℃过夜,然后 1000×g 离心 20 分钟,取上清即可,或
将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用 EDTA 或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在
采集后的 30 分钟内于 2-8℃ 1000×g 离心 15 分钟,取上
清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免
反复冻融。
3. 组织匀浆:用预冷的 PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除
残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重
后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的 PBS(一般按
1:9 的重量体积比,比如 1g 的组织样品对应 9mL 的 PBS,
具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在
PBS 中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充
分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超
声破碎,或反复冻融。后将匀浆液于 5000×g 离心 5~10
分钟,取上清检测。
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4. 细胞培养物上清:请 1000×g 离心 20 分钟,取上清即可检
测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
5. 其它生物标本:1000×g 离心 20 分钟,取上清即可检测。
6. 样品外观:样品应清澈透明,悬浮物应离心去除。
7. 样品保存:样品收集后若在 1 周内进行检测的可保存于
4℃,若不能及时检测,请按一次使用量分装,冻存于-20℃
(1 个月内检测),或-80℃(6 个月内检测),避免反复冻
融,标本溶血会影响后检测结果,因此溶血标本不宜进
行此项检测。
注意事项:
1. 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所
有试剂都必须在使用达到室温 20-25℃。使用后立即冷
藏保存试剂。
2. 洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物确保尽
量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
3. 消除板底残留的液体和手指印,否则影响 OD 值。
4. 底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不
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能使用。
5. 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
6. 在储存和温育时避免强光直接照射。
7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
8. 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强
烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物
活性。
9. 不能使用过期产品。
10. 如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的
程序处理样品和检测装置。
原创作者:上海初态生物科技有限公司






