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技术文章
细胞容易污染?如何正确冻存细胞
点击次数:3131 发布时间:2022/6/15 9:39:29
随着实验室细胞培养的发展,除了原代培养之外,还将建立开发或获得众多的细胞系。每一个细胞系均扩大了其起源细胞的应用,成为有价值的资源。若该细胞系颇为独特,则其可能是不可替换的;替换至少也是昂贵与耗时的。因此,必须通过保存细胞系来确保这种重要投资。 由于培养早期传代培养的选择,有限细胞系的衰老以及连续细胞系的遗传和表现不稳定性,使细胞系在连续培养时有变异倾向。 此外,即使在管理好的实验室中也有可能发生仪器故障和污染。交叉污染以及错误辨识的发生率也很高。因此,存在诸多理由进行冷冻储存细胞,总体概述有10大不得不冻存细胞的理由: ①由于遗传不稳定性而导致基因漂移; ②衰老,导致细胞系消失; ③生长特性的转化以及恶性相关特性的获得; ④由于选择和去分化导致表型的不稳定性; ⑤微生物污染; ⑥其他细胞系的交叉污染; ⑦由于操作粗心而导致的错误鉴别; ⑧孵育箱故障; ⑨对于保存那些不立即使用的细胞系,可节省时间和材料; ⑩需要将细胞系转给其他使用者。 在考虑冻存细胞之,需满足以下特定条件: 01 确认冻存需证实细胞系未受污染,且确为该细胞系。尽管对于新获得的细胞系,可以在确认冻存几支,但在大量冻存应进行确认。 冻存时间,如果是有限细胞系,这些细胞应经5代倍增生长,获得足够量的细胞再进行冻存。连续细胞系应将其克隆化,选择特征性的克隆,待生长至足够数量再进行冻存。连续细胞系有其优势:它们可无限生长,生长比较迅速,容易克隆,但是它们缺乏遗传稳定性。有限细胞系通常或接近二倍体。在一定传代水平间是稳定的,但是,它们很难克隆,生长缓慢,终死亡或发生转化。 02 推荐产品 【SNL-018】人胚肺细胞 【SNS-002】特胎牛血清 【SNM-002D】DMEM高糖(含丙酮酸钠、谷氨酰胺,含双抗) 公司介绍 武汉尚恩生物技术有限公司坐落于武汉东湖高新区光谷生物城,注于细胞及系列产品的研发、生产和服务,公司建有标准化GMP实验室、动物房,已整体通过ISO 9001:2015质量管理体系认证,获得高新技术企业、3551人才、瞪羚企业、科技小巨人等多项荣誉。 公司主要研发生产细胞系、原代细胞、胎牛血清、培养基、辅助试剂等系列产品,提供细胞及培养配套产品一站式采购;细胞库冻存细胞系500余种,同时通过不间断引种细胞扩大丰富细胞种类;公司还提供人源细胞系的STR鉴定、大小鼠的种属鉴定服务等。 END
原创作者:武汉尚恩生物技术有限公司






