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技术文章
胎牛血清需要灭活吗？
点击次数：2764 发布时间：2024/12/23 17:07:58
关于是否应对胎牛血清进行热灭活处理一直存在争议。血清灭活起源于20世纪70年代之，在过去并未有人质疑灭活的必要性，灭活一直是默认的常规操作。然而越来越多的证据表明，血清热灭活对细胞并没有显著的正面作用。随着研究者们对血清的理解加深以及胎牛血清生产工艺的不断进*，如热灭活不再是必选项。
什么是灭活
血清热灭活是指将溶解状态的血清置于56℃水浴加热30min。灭活的主要目的是为了去除血清中的补体成分或者支原体等病原体。
什么是补体
补体是存在于动物血液与组织液中的一组经活化后具有酶活性的蛋白质，它们可辅助特异性抗体完成免疫溶菌和溶血作用，故称为补体。激活的补体可介导细胞毒性作用，刺激平滑肌细胞收缩，刺激血小板释放组胺，激活淋巴细胞和巨噬细胞等。
血清中的补体
胎牛的补体系统的发育不完整，因此胎牛血清中的补体含量非常低。Triglia和Linscott测定了牛血清中9种补体成分：胎牛血清中凝集素、C1和C6的含量约为成年牛的1-3%，除C3外其余成分的含量约为成年牛的5-50%，C3活性几乎检测不到。在补体结合试验中，在未稀释的血清中并未出现溶血现象。
热灭活对细胞的影响
热灭活并不会改善细胞的状态。加热血清会导致生长因子、维生素、氨基酸等多种营养物质被破坏，反而影响细胞的增殖速度和贴壁能力。有研究表明，热灭活会损害血清中一些促进细胞附着的成分。除此之外，热灭活过程中还会产生大量的沉淀，这些沉淀物可能被误认为是微生物污染，从而给实验带来不必要的困扰。
支原体问题
尚恩生物血清产品经过万GMP标准过滤灌装线,连续3道0.1um滤膜过滤。通过细菌、真菌、支原体、噬菌体、病毒等多种病原体检测，完*不用担心污染问题，也不需要用热灭活的方式进行灭菌。
综上，对于细胞培养效果而言，血清灭活可能弊大于利。因此大部分细胞培养没有必要进行血清灭活去除补体。不过在某些特殊情况下，如某些免疫学相关实验或平滑肌细胞相关实验，可能需要对血清进行灭活处理。在实际应用中，同学们还是要根据实验需求来决定是否灭活血清哦~
参考文献
1. Triglia, R.P., Linscott,W.D. Titers of nine complement components, conglutinin ａnd C3b-inactivator in adult ａnd fetal bovine sera. Mol Immunol 17, 741-748 (1980).
2. Application-specific technical information – Application Notes: Heat inactivation – Are you wasting your time? Reprinted from Art To Science, 15, No. 1
3. Giard, D.J. Routine heat inactivation of serum reduces its capacity to promote cell attachment. In Vitro Cellular & Developmental Biology 23, 691-697 (1987).
原创作者：武汉尚恩生物技术有限公司
